铜死亡常见FAQs

1 铜死亡最核心的研究指标是什么？

铜死亡研究处于起步阶段，暂时没有明确的核心指标，相关文献涉及的指标常见的有细胞铜，TCA循环及ETC系列指标。

2 如果细胞样本中检测到铜离子含量显著增加，是否可以说明细胞发生了铜死亡？

细胞发生铜死亡的显著特征之一是铜离子的积累，但并不能从单个指标的变化就确定细胞的确发生了铜死亡。

3 在铜死亡中，铜离子起到什么作用？

① 铜离子通过芬顿反应产生大量活性氧（ROS），引发DNA损伤和脂质过氧化；

② 铜离子通过抑制泛素-蛋白酶体系统来抑制细胞蛋白酶活性，并抑制细胞增殖；

③ 铜离子通过与脂酰化蛋白（丙酮酸、α-酮戊二酸、支链铜酸脱氢酶和甘氨酸裂解系统）结合，诱导脂酰化蛋白的聚集并抑制线粒体代谢功能，从而促进细胞发生铜死亡。

4 铜死亡有哪些特征？
生物学特征：铜离子、丙酮酸、α-酮戊二酸（α-KG）、HSP70升高；Fe-S减少。
形态特征：线粒体皱缩、细胞膜的破裂。

5 E-BC-K775-M这个试剂盒检测的是一价铜离子还是二价铜离子，还是两者都有？

本试剂盒检测的是样本中的二价铜离子(Cu2+)的含量。

6  E-BC-K775-M这个试剂盒可以检测血清样本吗？

E-BC-K775-M适用于细胞样本，如果需要检测血清、血浆或者组织样本，建议选择E-BC-K300-M试剂盒。

7 E-BC-K300试剂盒检测组织样本，对组织样本的处理有要求吗？

金属螯合剂（如EDTA）会干扰此分析，在样品制备中应避免使用。

8 细胞样本如何进行破碎处理？

E-BC-K775-M试剂盒使用细胞裂解液对细胞样本进行处理，加入裂解液后，只需在冰盒上静置10分钟，即可离心取上清液待测，有效提升了细胞破碎效率。

9 细胞样本需要稀释吗？

如果样本中的铜离子含量超过试剂盒的最大检测值，需要对样本进行稀释。但由于细胞样本中的铜离子含量一般比较低，所以细胞样本不需要进行稀释。

10 E-BC-K775-M试剂盒，未能检出样本值是什么原因？

可能是测定的细胞中铜离子含量较低，样本中铜离子含量低于试剂盒检出限。可适当增加样本细胞数量，以提高检测样本中铜离子的浓度。

11线粒体复合物系列试剂盒，检测组织样本，必须是新鲜的样本吗，冻存的样本能否检测？

建议尽量使用新鲜样本检测，如果是冻存样本，可能会使结果偏低或测不出。冻存时间越长，对测值的影响越大，一般样本-80℃冻存不要超过一个月，如果冻存时间超过一个月了，不建议使用。

12 线粒体复合物系列试剂盒，组织样本必须检测蛋白浓度吗？

组织样本需要进行匀浆处理，匀浆程度不同，释放出的蛋白浓度也不同。通过检测样本中的蛋白含量，可以校正样本匀浆过程中差异，保证测值的准确性，因此组织样本需要检测蛋白浓度。

13 α-酮戊二酸试剂盒中样本处理要求使用50 KD 的超滤管进行超滤，请问可以不超滤吗？

超滤是为了除去一些蛋白的干扰，保证样本测值的准确性，这一步操作不可以省略。