样本少？含量低？试试荧光法试剂盒吧！

使用比色法检测指标的时候，有的老师会遇到样本用量太大、样本值无法测出、操作繁琐、用时太长等困扰。此种情况下，不妨试试荧光法试剂盒，能显著提升实验效率。

表一：荧光法检测与比色法检测对比

方法		荧光法	比色法
相同点		分子光谱
不同点	本质	发射光谱	吸收光谱
	灵敏度	10-8~10-10 g/mL	10-5~10-7 g/mL
	特异性	高	低

荧光法试剂盒检测原理

具有特定结构的物质在吸收特定波长的能量后，其分子跃迁至激发态。从激发态回到基态的过程中，会以光的形式释放部分能量，形成荧光。

在一定浓度范围内，物质产生荧光的强度（F）与物质浓度（C）成正比，即F = kC。因此，可以通过检测仪器测定荧光强度，从而计算物质的浓度。

图一：物质产生荧光的原理

荧光法测试盒特点

01 灵敏度更高，样本用量少

荧光法测试盒的灵敏度，通常较比色法高出24个数量级，而所需样本用量一般少于比色法检测所需用量。如组织游离脂肪酸的测定，使用比色法需要500μL样本，而荧光法测定仅需0.125μL。对于无法富集或难以获取的样本，荧光法测试盒能满足更多实验需求。

表二：同一指标用比色法和荧光法检测的灵敏度对比

检测指标	比色法灵敏度	荧光法灵敏度
过氧化氢	410 μmol/L	0.02 μmol/L
ATP	10 μmol/L	0.003 μmol/L
尿酸	7.74 μmol/L	0.03 μmol/L
总胆固醇	290 μmol/L	0.12 μmol/L
葡萄糖	40 μmol/L	0.1 μmol/L
游离脂肪酸	150 μmol/L	0.58 μmol/L
TBARS	0.85 μmol/L	0.09 μmol/L
蔗糖	320 μmol/L	0.15 μmol/L

02 特异性更强

光法测试盒采用“酶+荧光探针”的检测原理，使荧光法检测选择性更高，特异性更强。

图二：使用“酶-荧光探针”的方法测定待测指标浓度

03 操作更简单

相较于比色法，荧光法测试盒的试剂组成更简单，检测速度更快，样本适用性更广，能大幅减少实验时间和工作量。

表三：ATP含量测试盒对比

方法	荧光法	比色法
试剂个数	4	9
时间（min）	5-10	50-60
样本适用性	组织，细胞	组织

产品应用

图三：荧光法测试盒的常见应用

荧光法测试盒在众多研究领域有着广泛应用。例如，2021年，南京大学医学院研究团队在Frontiers in Pharmacology发表文章，揭示了SOAT1蛋白在胃癌发展和淋巴结转移中的作用，及Avasimibe在胃癌治疗过程中的抗肿瘤效果。

图四：南京大学医学院团队所发表文献的标题

研究过程中，研究人员使用了荧光法测试盒，对细胞样本的总胆固醇和胆固醇酯含量进行了检测，得到结果如下图^[1]：

图五：

A. 敲除SOAT1基因，能显著降低细胞中的胆固醇含量；

B. 使用SOAT1抑制剂Avasimibe（浓度大于10μM），能显著降低细胞中的胆固醇含量。

表四：Elabscience^®荧光法试剂盒产品

指标	样本类型	研究领域
糖原	动物肝脏、肌肉组织样本	糖代谢
蔗糖	植物组织	糖代谢，光合作用
尿酸	血清（浆）、尿液等液体样本及动物组织样本	肾功能
活性氧	组织细胞，培养细胞	氧化应激
葡萄糖	血清、血浆、尿液、体液、细胞	糖代谢，糖尿病
过氧化氢	血清(浆)、动植物组织，细胞	氧化应激
葡萄糖摄取	细胞样本	糖代谢
过氧化氢酶	血清（浆）、动植物组织样本	氧化应激
黄嘌呤氧化酶	血清（浆）、动物组织样本	氧化应激
TBARS	血清（浆）、动物组织、细胞	氧化应激
丙氨酸氨基转移酶(ALT)	血清（浆）、动植物组织样本	肝功能
髓过氧化物酶(MPO)	血清（浆）、动物组织样本	氧化应激