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7个小妙招,教你如何选ELISA试剂盒

Source: Elabscience®Published: 2022-09-15

市面上的ELISA试剂盒五花八门,质量良莠不齐。如何浪里淘金,选择既符合科研需求,又品质上乘的ELISA试剂盒呢?

Elabscience教你七招,快速搞定ELISA试剂盒的选择!

01 查找待测样本的蛋白浓度

通过检索SCI文献、Genecards、Mayocliniclabs等,获得目标蛋白的表达部位及表达浓度参考值,比较ELISA试剂盒中给出的样本测值与参考值是否一致。

02 明确试剂盒的应用种属&检测的样本类型

不同厂家验证的样本类型不同。除试剂盒特别说明外,一般情况下,不同种属不能通用。常见待测样本类型有:血清、血浆、细胞上清、组织匀浆、细胞裂解液等。实验前,需要判断试剂盒能否满足目标物种的目标蛋白检测。

03 明确试剂盒的检测范围

试剂盒的检测范围即标准曲线范围。标准曲线范围不等同于样本浓度范围,所以,要特别注意判断待测样本浓度是否落在标准曲线范围内。对于浓度很高的样本,建议先通过预实验,摸索出合适的稀释倍数后,再大量测定样本。

04 明确试剂盒的国际质控标准

1 稀释线性

一般指样本稀释线性,即:将样本梯度稀释,看各稀释梯度浓度是否成线性;对于高浓度样本,建议选择OD值落在标曲范围中部的稀释倍数为最佳稀释倍数。

2 回收率

评估试剂盒测量结果趋于真实值程度的指标。一般添加标准品(重组蛋白)到天然样本基质内,进行测定。通常,线性及回收率的范围在80%-120%比较合适。

3 天然样本检测

确保试剂盒可以检测天然样本及合适的样本类型。可根据靶蛋白性质对天然样本进行选择,例如:血清、血浆、细胞上清、尿液、唾液和乳汁等。

4 交叉反应

通过交叉反应评估试剂盒的特异性。交叉反应越小,说明试剂盒的特异性越好。

与同家族其他蛋白或结构类似物的交叉反应。

与其他种属相同靶点蛋白的交叉反应。

与血清中常见因子的交叉反应。

5干扰试验

判断其他分子与抗原-抗体对之间相互作用的影响。干扰性越大,待测物测定值越不准确。

评估靶蛋白配体的干扰。

评估靶蛋白受体的干扰。

6稳定性

判定试剂盒在规定条件下储存时间长短的标准。一般通过热加速稳定性实验验证。

将试剂盒在37℃条件下放置7天,与4℃条件下放置的相同产品进行比较。

各项性能检测结果的偏差均应<15%。

7 精密度

试剂盒重复实验时,误差大小的评估标准。通常用CV表示。一般情况下,批间、批内变异系数(CV)均应<15%。

8 最低检测限

试剂盒灵敏度的判定标准。最低检测限的值越低,表明试剂盒越灵敏。如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的ELISA试剂盒。

市场上的ELISA试剂盒常被分为低端、中端和高端三类,一般也用这八项质控来定义:

ELISA试剂盒分类

05 选择美誉度高的品牌

选购试剂盒时,我们要尽量选择品牌知名度高、美誉度高的品牌,在确保产品质量过关的同时,还能获得更优质的售前售后服务常见的国外品牌如R&D、Abcam,国产品牌如Elabscience®等,就在生命科学权威评奖机构CiteAb上,获得了重要奖项及高度赞誉。该平台素以产品的引用文献数量及全球影响力,作为奖项评定指标。

06 选择性价比高的产品

预算也是选购ELISA产品的要素之一。在保证试剂盒质量可靠的情况下,选择性价比高的产品。生物学是极其严谨的科学,实验结果的准确性是项目基金、文章等评审必不可少的因素。假如无法完美地获得或重现实验结果,即便有低廉的价格,也是资源的另一种浪费。

07 选择文献引用多的品牌

挑选ELISA试剂盒时,SCI文献的引用数量最具参考价值。这也是业界对产品认可程度的一项非常重要的指标。尤其在选择国内品牌时,一定要多了解该品牌的文献引用情况(总数量&最高影响因子)以及品牌在业内的口碑。大家可以在Google scholar等文献搜索引擎,丁香通、小木虫等行业论坛进行检验。

Elabscience® · ELISA试剂盒特点

产品数量多:1300+ELISA试剂盒,涉及10多个研究领域

种属范围广:包含人、小鼠、大鼠、兔、猴、猪等

规格种类多:48T/96T/96T*5

套装完整性:包含实验所需整套试剂,方便使用

高精密度:批内、批间CV<10%

良好回收率:80%~120%

高灵敏度:pg级

高特异性:交叉反应率<10%

文献支持:SCI文献引用8000+篇

货期短:大量现货,2-3个工作日内发货

欢迎各位科研工作者按需选购Elabscience ELISA试剂盒。


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