中文名:8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:7,8-Dihydro-8-oxo-2'-deoxyguanosine; 7,8-Dihydro-8-oxodeoxyguanosine; 8-Hydroxy-2'-deoxyguanosine; 8-Hydroxydeoxyguanosine; 8-Oxo-2'-deoxyguanosine; 8-Oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine; 8-Oxo-7,8-dihydrodeoxyguanosine; 8-Oxo-dG; 8-OH-dG
反应性: 通用
检测范围: 1.56~100 ng/mL
灵敏度: 0.94 ng/mL
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然8-OHdG浓度。
本试剂盒采用竞争ELISA法。用8-OHdG抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的8-OHdG与包被的8-OHdG竞争生物素标记的抗8-OHdG单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,8-OHdG浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中8-OHdG的浓度。
反应类型 | 竞争法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 2.0h |
反应性 | 通用 |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 1.56-100 ng/mL |
灵敏度 | 0.94 ng/mL |
样本体积 | 50μL |
样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
可检测样本中的8-OHdG,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内,板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (ng/mL) |
4.79 | 10.11 | 46.98 | 4.48 | 9.61 | 48.89 |
Standard
deviation |
0.27 | 0.58 | 1.69 | 0.27 | 0.55 | 1.91 |
C V (%) | 5.66 | 5.69 | 3.60 | 5.95 | 5.70 | 3.90 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 86-100 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 91-104 | 98 |
Cell culture media (n=8) | 93-106 | 98 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 92-104 | 87-101 | 90-103 |
Average (%) | 98 | 92 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 89-106 | 82-94 | 83-95 |
Average (%) | 97 | 88 | 90 | |
1:8 | Range (%) | 93-106 | 85-100 | 88-99 |
Average (%) | 100 | 92 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 87-102 | 86-99 | 88-101 |
Average (%) | 94 | 92 | 96 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
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1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育45分钟 |
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2. 弃掉板内液体,洗板3次 |
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3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
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4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
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5. 每孔加入50μL终止液 |
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6. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
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