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Caspase 3 Activity Colorimetric Assay Kit E-CK-A311

  • 货号:E-CK-A311

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检测原理

Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain,属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),是细胞凋亡过程中的一个关键酶,也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。Caspase 3可以剪切pro-Caspase 2、6、7和9,并可直接特异性剪切许多Caspase 底物,包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)、ICAD (Inhibitor of Caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,Caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention)、DNA片段化(DNA fragmentation)等。同时Caspase 3对细胞起泡(Cell blebbing)也起到关键作用。Caspase 3在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase 3被激活,活化的Caspase 3由两个大亚基和两个小亚基组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase 3分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase 3序列特异性的多肽(Ac-DEVD-pNA (acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被Caspase 3剪切后,黄色发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405 nm 或400 nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性。

基本信息

应用类型 Caspase
检测类型 定性分析
检测方法 比色法
样本类型 细胞,组织
检测时间 4-6 hours
检测仪器 分光光度计
自备试剂 PBS(E-BC-R187),Bradford蛋白测定试剂盒(E-BC-K168-S或E-BC-K168-M)
保存温度 -20°C
运输条件 冰袋
保质期 12 months

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