• 本公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断

Cell Cycle Assay Kit (Fluorometric - Red)[351]

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    产品货号:E-CK-A351

    中文名:细胞周期检测试剂盒(DNA含量检测)

    规格:
    • 20T
    • 50T
    • 100T
    数量:
    - +
    价格: ¥300

    产品简介

    Elabscience®的细胞周期检测试剂盒(DNA含量检测) 是通过检测DNA含量来检测细胞周期的试剂盒。本试剂盒可应用于培养细胞(悬浮、贴壁)的DNA含量(细胞周期)检测。


    检测原理

    细胞周期(cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制并加倍,且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期又可以分为间期(interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期又常划分为休眠期(G0),DNA合成前期(G1),DNA合成期(S),DNA合成后期(G2)。DNA周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况,即细胞增殖状况。利用细胞内DNA能够和荧光染料(如碘化丙啶—PI)结合的特性,细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样可检测细胞不同周期。

    细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核裂解,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞前向光散射能力显著降低,侧向光散射能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察凋亡细胞。

    PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1~2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。

    本试剂盒检测经70%乙醇固定过夜后的Molt-4细胞周期效果如下图所示:

    试剂盒组成


    产品编号

    成分

    20 T

    50 T

    100 T

    Storage

     E-CK-A351A

              RNase A溶液

    1 mL×2

    5 mL

    10 mL

    -20°C

     E-CK-A351B

          碘化丙啶(PI

     8 mL 

    10 mL× 2

     10 mL× 4 

    2~8°C

                    说明书

    一份




    保存条件

           RNase A溶液[E-CK-A351A]需-20°C保存。碘化丙啶(PI)[E-CK-A351B]需2~8°C避光保存。


    注意事项

    1.  保质期1年。为获得最佳的使用效果,请在3~6个月内使用。

    2.  实验结果需用流式细胞仪进行检测。

    3.  荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光。

    4.  碘化丙啶PI对人体有刺激,操作时请小心,并注意适当防护以免直接接触人体或吸入体内。

    5.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    6.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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