• 本公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断

Human COL1α2(Collagen Type Ⅰ Alpha 2) ELISA Kit

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    产品货号:E-EL-H0776c

    中文名:人Ⅰ型胶原α2(COL1α2)酶联免疫吸附测定试剂盒

    别称:COL1A2, OI4

    规格:
    • 96T
    • 48T
    • 96T*5
    数量:
    - +
    价格: ¥3000

    反应性:

    检测范围: 0.16~10 ng/mL

    灵敏度: 0.10 ng/mL

    货期: 3个工作日+顺丰周期

    在线咨询 比较 加入购物车 说明书

    用途

    该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组COL1α2浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人COL1α2抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人COL1α2会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人COL1α2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人COL1α2抗体与结合在包被抗体上的人COL1α2结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,COL1α2浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中COL1α2的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 Human
    检测方法 Colormetric
    检测范围 0.16—10 ng/mL
    灵敏度 0.10 ng/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 血清,血浆或其他生物体液

    特异性

    可检测样本中的人COL1α2,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average Corrected
    10 2.431
    2.445
    2.438 2.37
    5 1.525
    1.561
    1.543 1.475
    2.5 0.907
    0.891
    0.899 0.831
    1.25 0.41
    0.418
    0.414 0.346
    0.63 0.28
    0.266
    0.273 0.205
    0.32 0.169
    0.165
    0.167 0.099
    0.16 0.116
    0.122
    0.119 0.051
    0 0.067
    0.06900000000000001
    0.068 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    0.52 1.59 4.86 0.56 1.45 5.11
    Standard
    deviation
    0.03 0.07 0.15 0.03 0.07 0.26
    C V (%) 5.77 4.40 3.09 5.36 4.83 5.09

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 89-103 94
    EDTA plasma (n=5) 87-100 92
    Cell culture media (n=5) 87-102 93

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 100-114 99-112 93-108
    Average (%) 105 105 100
    1:4 Range (%) 86-100 83-96 87-101
    Average (%) 92 88 93
    1:8 Range (%) 90-101 85-100 84-96
    Average (%) 96 92 91
    1:16 Range (%) 89-104 83-95 84-97
    Average (%) 96 88 91

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟

    2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

    3. 弃掉板内液体,洗板3次

    4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

    5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

    6. 每孔加入50μL终止液

    7. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. Long non-coding RNA NNT-AS1 regulates proliferation, apoptosis, inflammation and airway remodeling of chronic obstructive pulmonary disease via targeting miR-582-5p/FBXO11 axis
      IF: 4.545
      Journal: Biomedicine & Pharmacotherapy(2020)
      DOI: 10.1016/j.biopha.2020.110326
      PMID: 99999999
      引用产品: E-EL-H0102c E-EL-H0109c E-EL-H0149c E-EL-H0776c 
      样本类型: Cell culture supernatant
      物种: Human
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