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Human LEP(Leptin) ELISA Kit

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    产品货号:E-EL-H6017

    中文名:人瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒

    别称:LEPD, OBS, Obesity Homolog

    规格:
    • 96T
    • 48T
    数量:
    - +
    价格: ¥2400

    反应性:

    检测范围: 15.63~1000 pg/mL

    灵敏度: 9.38 pg/mL

    货期: 3个工作日+顺丰周期

    在线咨询 比较 加入购物车 说明书

    用途

    该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组LEP浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人LEP抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人LEP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人LEP抗体与结合在包被抗体上的人LEP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,LEP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中LEP的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 Human
    检测方法 Colormetric
    检测范围 15.63—1000 pg/mL
    灵敏度 9.38 pg/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 血清,血浆或其他生物体液

    特异性

    可检测样本中的人LEP,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (pg/mL) O.D Average Corrected
    1000 2.54
    2.444
    2.492 2.432
    500 1.673
    1.613
    1.643 1.583
    250 0.908
    0.956
    0.9320000000000001 0.872
    125 0.486
    0.478
    0.482 0.422
    62.5 0.263
    0.263
    0.263 0.203
    31.25 0.181
    0.174
    0.178 0.118
    15.63 0.12
    0.116
    0.118 0.058
    0 0.061
    0.059
    0.06 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (pg/mL)
    41.50 112.90 459.52 43.08 120.81 467.85
    Standard
    deviation
    2.32 5.53 19.21 2.22 5.80 21.47
    C V (%) 5.59 4.90 4.18 5.15 4.80 4.59

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 91-103 96
    EDTA plasma (n=5) 93-104 96
    Cell culture media (n=5) 92-100 96

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 86-95 100-109 95-104
    Average (%) 91 105 99
    1:4 Range (%) 85-96 86-96 91-103
    Average (%) 93 91 97
    1:8 Range (%) 91-104 90-99 84-97
    Average (%) 97 93 91
    1:16 Range (%) 88-96 92-103 94-102
    Average (%) 92 100 97

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟

    2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

    3. 弃掉板内液体,洗板3次

    4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

    5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

    6. 每孔加入50μL终止液

    7. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. Porous graphene-black phosphorus nanocomposite modified electrode for detection of leptin
      IF: 9.518
      Journal: Biosensors and Bioelectronics(2019)
      DOI: 10.1016/j.bios.2019.04.045
      PMID: 31085402
      引用产品:
      物种: Human
    2. Contrasting short-term temperature effects on the profiling of metabolic and stress hormones in non-obese healthy adults: A randomized cross-over trial
      IF: 5.715
      Journal: Environmental Research(2020)
      DOI: 10.1016/j.envres.2019.109065
      PMID: 32069742
      引用产品: E-EL-H6017 
      样本类型: Urine
      物种: Human
    3. Adiponectin Receptors and pro-inflammatory Cytokines Are Modulated in Common Variable Immunodeficiency Patients: Correlation With Ig Replacement Therapy
      IF: 5.085
      Journal: Frontiers in immunology(2019)
      DOI: 10.3389/fimmu.2019.02812
      PMID: 31827477
      引用产品: E-EL-H6017 
      样本类型: Serum
      物种: Human
    4. Effect of Ramadan diurnal fasting on visceral adiposity and serum adipokines in overweight and obese individuals
      IF: 4.234
      Journal: Diabetes research and clinical practice(2019)
      DOI: 10.1016/j.diabres.2019.05.023
      PMID: 31150725
      引用产品: E-EL-H0086c E-EL-H0102c E-EL-H0103c E-EL-H0109c E-EL-H0456c E-EL-H1213c E-EL-H1763c E-EL-H5811c E-EL-H6017 
      样本类型: Serum
      物种: Human
    5. High Ghrelin Level Predicts the Curve Progression of Adolescent Idiopathic Scoliosis Girls.
      IF: 2.583
      Journal: BioMed Research International(2018)
      DOI: 10.1155/2018/9784083
      PMID: 30079352
      引用产品: E-EL-H1919c 
      样本类型: Serum
      物种: Human
    6. Placental Peptides Metabolism And Maternal Factors As Predictors Of Risk Of Gestational Diabetes In Pregnant Women. A Case-Control Study.
      IF: 2.806
      Journal: PloS one(2017)
      DOI: 10.1371/journal.pone.0181613
      PMID: 28732072
      引用产品:
      样本类型: Serum
      物种: Human
    7. Roles and mechanisms of leptin in osteogenic stimulation in cervical ossification of the posterior longitudinal ligament.
      IF: 1.61
      Journal: Journal of Orthopaedic Surgery and Research(2018)
      DOI: 10.1186/s13018-018-0864-4
      PMID: 29970120
      引用产品:
      样本类型: Serum
      物种: Human
    8. Lepr Gene Polymorphism And Plasma Soluble Leptin Receptor Levels Are Associated With Polycystic Ovary Syndrome In Han Chinese Women.
      IF: 1.01
      Journal: Personalized Medicine(2017)
      DOI: 10.2217/pme-2017-0016
      PMID: 29749830
      引用产品:
      样本类型: Plasma
      物种: Human
    9. Association Between Total antioxidant Capacity and Leptin Levels in Type-2 Diabetic Patients.
      Journal: karbala Journal of pharmaceutical sciences(2017)
      引用产品:
      样本类型: Serum
      物种: Human
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