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Human PDGF-AA(Platelet Derived Growth Factor AA) ELISA Kit

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    产品货号:E-EL-H1575c

    中文名:人血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)酶联免疫吸附测定试剂盒

    别称:PDGF-AA

    规格:
    • 96T
    • 48T
    数量:
    - +
    价格: ¥3000

    反应性:

    检测范围: 15.63~1000 pg/mL

    灵敏度: 9.38 pg/mL

    货期: 3个工作日+顺丰周期

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    用途

    该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PDGF-AA浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人PDGF-AA抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人PDGF-AA会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人PDGF-AA抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人PDGF-AA抗体与结合在包被抗体上的人PDGF-AA结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,PDGF-AA浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中PDGF-AA的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 Human
    检测方法 Colormetric
    检测范围 15.63—1000 pg/mL
    灵敏度 9.38 pg/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 血清,血浆或其他生物体液

    特异性

    可检测样本中的人PDGF-AA,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (pg/mL) O.D Average Corrected
    1000 2.332
    2.364
    2.348 2.265
    500 1.578
    1.606
    1.592 1.509
    250 1.008
    1
    1.004 0.921
    125 0.448
    0.47
    0.459 0.376
    62.5 0.273
    0.245
    0.259 0.176
    31.25 0.186
    0.182
    0.184 0.101
    15.63 0.13
    0.14
    0.135 0.052
    0 0.083
    0.083
    0.083 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (pg/mL)
    45.83 101.32 464.35 44.00 92.31 460.16
    Standard
    deviation
    2.36 4.33 14.72 3.01 5.30 17.53
    C V (%) 5.15 4.27 3.17 6.84 5.74 3.81

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 94-108 102
    EDTA plasma (n=5) 85-96 91
    Cell culture media (n=5) 88-102 95

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 95-106 89-102 84-99
    Average (%) 100 95 91
    1:4 Range (%) 87-100 80-91 86-96
    Average (%) 94 86 91
    1:8 Range (%) 93-107 81-93 87-98
    Average (%) 98 86 92
    1:16 Range (%) 88-103 84-97 83-95
    Average (%) 95 91 89

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟

    2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

    3. 弃掉板内液体,洗板3次

    4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

    5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

    6. 每孔加入50μL终止液

    7. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. Leukocyte Depletion Does Not Affect The In Vitro Healing Ability Of Platelet Rich Plasma.
      IF: 1.785
      Journal: Experimental and Therapeutic Medicine(2018)
      DOI: 10.3892/etm.2018.5887
      PMID: 29556269
      引用产品: E-EL-H0108c E-EL-H1577c E-EL-H1575c E-EL-H1670c E-EL-0162c E-EL-H0109c E-EL-H0092c 
      物种: Human
    2. Mechanical, chemical, structural analysis and comparative release of PDGF-AA from L-PRF, A-PRF and T-PRF - an in vitro study
      Journal: Biomaterials Research(2020)
      DOI: 10.1186/s40824-020-00193-4
      PMID: 32944280
      引用产品: E-EL-H1575c 
      样本类型: Cell culture medium
      物种: Human
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