Mini Sample Mouse GM-CSF (Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
中文名称：微量法小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)酶联免疫吸附测定试剂盒
Price:
- 反应性： Mouse
- 检测范围： 7.81-500 pg/mL
- 灵敏度： 4.67 pg/mL
| 系列介绍 | MS为Mini Sample的缩写。MS系列试剂盒的上样量仅为传统夹心法ELISA试剂盒的1/4，能有效解决实验样本体积不够的问题。Elabscience®自主开发的新技术，旨在帮助您以更高效的方式进行科学研究。 |
| 用途 | 试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其他生物体液中GM-CSF浓度 |
| 产品应用 | ELISA |
| 检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠GM-CSF抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的小鼠GM-CSF会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗小鼠GM-CSF抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗小鼠GM-CSF抗体与结合在包被抗体上的小鼠GM-CSF结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，GM-CSF浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中GM-CSF的浓度。 |
| 反应类型 | Sandwich-ELISA |
| 规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
|
| 反应时间 | 3 h 30 min |
| 反应性 | Mouse |
| 检测方法 | 比色法;ELISA;夹心法 |
| 检测范围 | 7.81-500 pg/mL |
| 灵敏度 | 4.67 pg/mL |
| 样本体积 | 25 μL |
| 样本类型 | 血清、血浆、细胞上清、细胞提取液体、组织匀浆等其他生物体液 |
| 特异性 | 可检测样本中的小鼠GM-CSF，且与其它类似物无明显交叉反应 |
| 精密度 | 板内，板间变异系数均<10% |
| 回收率 | 80%-120% |
| 储存条件 | 2-8℃/-20℃ |
| 有效期 | 6个月 |
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Q1:ELISA实验是否需要设置复孔？
为了保证实验结果的准确性，建议标准品和样品都做复孔检测。当然，ELISA实验并非要求一定做复孔/3复孔，客户可根据自己的需求设置实验的复孔与否。
Q2:试剂盒中铝箔袋、覆膜的用途是什么？
除了已真空封存酶标板的铝箔袋外，试剂盒内会附赠一个空的铝箔袋，客户可以将拆卸的酶标板条密封保存于新铝箔袋内并按照说明书要求存放组分。 覆膜是在孵育阶段用于密封板孔的粘性膜，能控制和减少孵育阶段水分的蒸发并更好地维持整板均匀受热，最大程度降低边缘效应对检测结果的影响。
Q3:说明书中的标曲可以直接用来样本计算吗？
说明书上的标曲是指示标曲，主要是用于呈现拟合后标曲的形态以及最高/最低OD值的质控范围，不能直接使用。此外，受实验操作、实验环境以及仪器参数设定等因素的影响，实际操作获得的标曲OD值可能会跟说明书不完全一致（整体偏高或偏低），这种情况，建议通过在显色阶段控制前4个蓝色孔有明显颜色梯度，标曲最大OD值在1.2以上，以及标曲的相关系数在0.99以上，作为有效标曲。
Q4:试剂盒为什么建议做预实验？如何进行预实验？
预实验的目的是： 1．确定该试剂盒是否适合您的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费； 2．帮助您熟悉试剂盒的操作流程，尤其是初次使用ELISA试剂盒/更换实验品牌的客户； 3．确定样本稀释与否及稀释倍数是否适合本试剂盒的测定并确认最适样本稀释信息； 4．帮助了解实验过程中可能出现的实验现象或者是问题，好及时作出调整； 具体方法：在正式检测前，选择差异较大的2-3个样本，进行不同浓度的样本稀释，然后按照说明书上的实验操作步骤进行预实验，根据预实验的结果，再结合试剂盒的检测范围来确定样本的最佳稀释倍数。
Q5:怎样判断样本是否需要稀释或者是否需要其他处理？
试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果是常规样本类型，可以咨询ELISA技术支持以获取样本的推荐稀释倍数并安排预实验检测。 如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。如果样本中的分析物浓度远低于试剂盒的最低检测线，建议选择灵敏度更高的试剂盒来检测。
Q6:ELISA实验时长为多久？
常规竞争法：2.0h左右。 夹心法：常规三步法3.5h左右；QuicKey系列2.5h左右；QuicKey Pro系列1.5h左右。
Q7:稀释方案
稀释100倍：一步稀释。取5μl样本到495μl标准品&样本稀释液内，做100倍稀释； 稀释1000倍：两步稀释。取5μl样本到95μl标准品&样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μl 20倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释1000倍； 稀释100000倍：三步稀释。取5μl样本到195μl标准品&样本稀释液内，做40倍稀释，再取5μl 40倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内，做50倍稀释，最后取5μl 2000倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000倍； 每步稀释时取液量不少于3μl，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。
Q8:如何进行超声操作？
使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞（参考：用Soniprep150超声波发生器以振幅14μm超声处理30秒，破碎细胞；或者用超声破碎仪，200W，2秒/次，间隙3秒，总时间3-5分钟或者400A，5秒/次，间隙10秒，反复3-5次）。再于2-8℃，以1500×g离心10分钟，去除细胞碎片，收集上清液。超声过程中注意控制温度。
Q9:为什么有些指标有两个货号的产品去测不同的样本类型呢？
各种样本类型的基质是不一样的，为了降低基质本身的影响并提高常规样本测值的准确性，通常会设定不同体系的ELISA试剂盒，并以不同的货号展示。另外，有些指标在不同样本间浓度差异很大，所以通过不同的产品来满足客户对于操作便捷性的需求。
Q10:测多个指标但是样本量不够怎么处理？
试剂盒的上样量是不能调整的，但是因为试剂盒灵敏度比较高，很多指标可以稀释检测。建议客户将待检指标和样本量的信息及时提供给技术支持，技术支持会进一步确认样本稀释信息并提供检测方案。
实验操作视频
