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Mouse GLP-1(Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit

产品货号:E-EL-M3012

中文名:小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒

别称:GLP1

规格:

96T
48T
96T*5

数量:

- +

价格: ￥2600

反应性: 小鼠

检测范围: 0.16~10 ng/mL

灵敏度: 0.10 ng/mL

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用途

该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组GLP-1浓度

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠GLP-1抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠GLP-1会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠GLP-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠GLP-1抗体与结合在包被抗体上的小鼠GLP-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，GLP-1浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中GLP-1的浓度。

反应类型	夹心法
规格	96T
反应时间	3.5h
反应性	Mouse
检测方法	Colormetric
检测范围	0.16—10 ng/mL
灵敏度	0.10 ng/mL
样本体积	100μL
样本类型	血清，血浆或其他生物体液

特异性

可检测样本中的小鼠GLP-1，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

重复性

板内，板间变异系数均<10%。

典型数据

由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

(ng/mL)	O.D	Average	Corrected
10	2.475 2.559	2.517	2.456
5	1.646 1.663	1.655	1.594
2.5	0.983 0.903	0.941	0.882
1.25	0.45 0.512	0.481	0.42
0.63	0.262 0.264	0.263	0.202
0.32	0.171 0.184	0.178	0.117
0.16	0.115 0.126	0.121	0.06
0	0.057 0.064	0.061	--

精密度

板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (ng/mL)	0.50	1.24	4.27	0.43	1.19	4.32
Standard deviation	0.03	0.06	0.20	0.02	0.06	0.21
C V (%)	6.00	4.84	4.68	4.65	5.04	4.86

回收率

分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Serum (n=8)	87-98	91
EDTA plasma (n=8)	93-102	96
Cell culture media (n=8)	95-109	101

线性

分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。

		Serum (n=5)	EDTA plasma (n=5)	Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	90-103	85-99	86-99
1:2	Average (%)	95	93	92
1:4	Range (%)	92-106	94-109	86-99
1:4	Average (%)	100	102	93
1:8	Range (%)	95-108	91-106	84-95
1:8	Average (%)	103	98	92
1:16	Range (%)	96-107	95-105	92-105
1:16	Average (%)	101	101	98

试剂盒组成及保存

未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

中文名称	英文名称	规格	保存条件
ELISA酶标板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 条	-20℃，可存放6个月
冻干标准品	Reference Standard	2 支
浓缩生物素化抗体(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
浓缩HRP酶结合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6个月
标准品&样品稀释液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6个月
生物素化抗体稀释液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶结合物稀释液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
浓缩洗涤液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反应终止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 张
产品说明书	Product Description	1 份
质检报告	Certificate of Analysis	1 份

说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。

试验所需自备物品

1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
4. 吸水纸

操作步骤

	1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本，37℃孵育90分钟
	2. 弃掉板内液体后，立即加入100μL生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟
	3. 弃掉板内液体，洗板3次
	4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液，37℃孵育30分钟，弃掉板内液体，洗板5次
	5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分钟左右
	6. 每孔加入50μL终止液
	7. 立即在450nm波长下读数，处理数据