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NA/NE(Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit

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    产品货号:E-EL-0047c

    中文名:去甲肾上腺素(NA/NE)酶联免疫吸附测定试剂盒

    别称:Norepinephrine, NE, noradrenaline, NA, NAd, norad, 4, 5-β-trihydroxyphenethylamine

    规格:
    • 96T
    • 48T
    • 96T*5
    数量:
    - +
    价格: ¥2400

    反应性: 通用

    检测范围: 0.31~20 ng/mL

    灵敏度: 0.19 ng/mL

    用途

    该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然NA/NE浓度。

    检测原理

    本试剂盒采用竞争ELISA法。用NA/NE抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的NA/NE与包被的NA/NE竞争生物素标记的抗NA/NE单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,NA/NE浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中NA/NE的浓度。

    反应类型 竞争法
    规格 96T
    反应时间 2.0h
    反应性 通用
    检测方法 Colormetric
    检测范围 0.31-20 ng/mL
    灵敏度 0.19 ng/mL
    样本体积 50μL
    样本类型 血清、血浆或其他相关生物液体

    特异性

    可检测样本中的NA/NE,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average
    20 0.32
    0.342
    0.331
    10 0.444
    0.45
    0.447
    5 0.654
    0.648
    0.651
    2.5 0.956
    0.958
    0.957
    1.25 1.339
    1.309
    1.324
    0.63 1.66
    1.658
    1.659
    0.31 1.9
    1.914
    1.907
    0 2.196
    2.21
    2.203

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

      Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    1.10 2.30 9.50 1.00 2.40 9.60
    Standard
    deviation
    0.10 0.10 0.30 0.10 0.10 0.40
    C V (%) 9.09 4.35 3.16 10.00 4.17 4.17

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=8) 88-99 93
    EDTA plasma (n=8) 94-110 102
    Cell culture media (n=8) 89-102 97

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

        Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 89-105 99-112 99-114
    Average (%) 96 105 106
    1:4 Range (%) 87-102 90-101 95-111
    Average (%) 94 96 102
    1:8 Range (%) 86-99 90-103 96-110
    Average (%) 92 97 102
    1:16 Range (%) 92-107 86-98 97-112
    Average (%) 97 93 104

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4.吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育45分钟

    2. 弃掉板内液体,洗板3次

    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

    4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

    5. 每孔加入50μL终止液

    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. Norepinephrine-stimulated HSCs secrete sFRP1 to promote HCC progression following chronic stress via augmentation of a Wnt16B/β-catenin positive feedback loop
      IF: 7.068
      Journal: Journal of Experimental & Clinical Cancer Research(2020)
      DOI: 10.1186/s13046-020-01568-0
      样本类型: Serum,Cell culture supernatant
      物种: Human
    2. Renal Denervation Attenuates Multi-Organ Fibrosis And Improves Vascular Remodeling In Rats With Transverse Aortic Constriction Induced Cardiomyopathy..
      IF: 5.104
      Journal: Cellular Physiology and Biochemistry(2016)
      DOI: 10.1159/000452561
      PMID: 27889753
      样本类型: Plasma,Tissue homogenate
      物种: Rat
    3. FGF21 Ameliorates The Neurocontrol Of Blood Pressure In The High Fructose-Drinking Rats.
      IF: 4.259
      Journal: Scientific Reports(2016)
      DOI: 10.1038/srep29582
      PMID: 27387420
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    4. Atrial Fibrillation In Acute Obstructive Sleep Apnea: Autonomic Nervous Mechanism And Modulation.
      IF: 4.644
      Journal: Journal of the American Heart Association(2017)
      DOI: 10.1161/JAHA.117.006264
      PMID: 28903938
      样本类型: Plasma
      物种: Universal
    5. Norepinephrine stimulation downregulates the β2-恆drenergic receptor-搉itric oxide pathway in human pulmonary artery endothelial cells
      IF: 3.923
      Journal: Journal of cellular physiology(2019)
      DOI: 10.1002/jcp.27057
      PMID: 30132872
      样本类型: Plasma
      物种: Human
    6. Intranasal Dexmedetomidine On Stress Hormones, Inflammatory Markers, And Postoperative Analgesia After Functional Endoscopic Sinus Surgery.
      IF: 3.232
      Journal: Mediators Of Inflammation(2015)
      DOI: 10.1155/2015/939431
      PMID: 26199465
      样本类型: Serum
      物种: Human
    7. The Locus Coeruleus-Norepinephrine System Mediates Empathy For Pain Through Selective Up-Regulation Of P2X3 Receptor In Dorsal Root Ganglia In Rats.
      IF: 3.005
      Journal: Frontiers in Neural Circuits(2017)
      DOI: 10.3389/fncir.2017.00066
      PMID: 28979194
      样本类型: Serum
      物种: Universal
    8. A Novel Swine Model Of Spontaneous Hypertension With Sympathetic Hyperactivity Responds Well To Renal Denervation.
      IF: 3.541
      Journal: American Journal of Hypertension(2016)
      DOI: 10.1093/ajh/hpv066
      PMID: 25958303
      样本类型: Plasma,Urine
      物种: Porcine
    9. Effects of botulinum toxin A on endometriosis-associated pain and its related mechanism
      IF: 2.1
      Journal: Molecular Medicine Reports(2020)
      DOI: 10.3892/mmr.2020.11501
      PMID: 33000241
      样本类型: Cell culture supernatant,Tissue homogenate
      物种: Mouse
    10. Selective ablation of the ligament of Marshall reduces ischemia and reperfusion-induced ventricular arrhythmias
      IF: 2.766
      Journal: PloS one(2018)
      DOI: 10.1371/journal.pone.0203083
      PMID: 30153281
      样本类型: Serum
      物种: Canine
    11. Differentiation of human glioblastoma U87 cells into cholinergic neuron
      IF: 2.159
      Journal: Neuroscience Letters(2019)
      DOI: 10.1016/j.neulet.2019.03.049
      PMID: 30928478
      样本类型: Cell culture supernatant
      物种: Human
    12. Oxidative stress and neuromodulatory effects of deltamethrin and its combination with insect repellents in rats
      IF: 2.491
      Journal: Environmental toxicology(2019)
      DOI: 10.1002/tox.22741
      PMID: 30884102
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    13. Selective ablation of the ligament of Marshall attenuates atrial electrical remodeling in a short‐term rapid atrial pacing canine model.
      IF: 2.873
      Journal: Journal of cardiovascular electrophysiology(2018)
      DOI: 10.1111/jce.13658
      PMID: 29864240
      样本类型: Serum
      物种: Canine
    14. The Role Of The Nox4-Derived ROS-Mediated RhoA/Rho Kinase Pathway In Rat Hypertension Induced By Chronic Intermittent Hypoxia.
      IF: 2.288
      Journal: Sleep and Breathing(2017)
      DOI: 10.1007/s11325-016-1449-2
      PMID: 28078487
      样本类型: Serum,Tissue homogenate
      物种: Rat
    15. The Effect of Peripheral Adropin Application on Hypothalamic Pituitary Adrenal Axis in Rats
      Journal: Turkish Journal of Science(2019)
      DOI: 99999999
      样本类型: Tissue homogenate
      物种: Rat
    16. Research on the evaluation indexes of animal model of liver-fire hypertension syndrome
      Journal: IOP Conference Series: Materials Science and Engineering. IOP Publishing(2018)
      DOI: 10.1088/1757-899X/397/1/012132
      样本类型: Serum
      物种: Rat
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