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Rat LEP(Leptin) ELISA Kit

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    产品货号:E-EL-R0582c

    中文名:大鼠瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒

    别称:LEPD, OB, OBS, Obesity Homolog

    规格:
    • 96T
    • 48T
    数量:
    - +
    价格: ¥2400

    反应性: 大鼠

    检测范围: 0.16~10 ng/mL

    灵敏度: 0.10 ng/mL

    货期: 3个工作日+顺丰周期

    加入购物车 比较 咨询 说明书

    用途

    该试剂盒用于体外定量检测Rat 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组LEP浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠LEP抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠LEP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠LEP抗体与结合在包被抗体上的大鼠LEP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,LEP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中LEP的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 Rat
    检测方法 Colormetric
    检测范围 0.16—10 ng/mL
    灵敏度 0.10 ng/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 血清,血浆或其他生物体液

    特异性

    可检测样本中的大鼠LEP,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average Corrected
    10 2.264
    2.31
    2.287 2.226
    5 1.424
    1.426
    1.425 1.364
    2.5 0.81
    0.8
    0.805 0.744
    1.25 0.373
    0.387
    0.38 0.319
    0.63 0.226
    0.22
    0.223 0.162
    0.31 0.154
    0.144
    0.149 0.088
    0.16 0.107
    0.109
    0.108 0.047
    0 0.056
    0.066
    0.061 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    0.50 1.50 4.40 0.50 1.50 4.80
    Standard
    deviation
    0.03 0.08 0.17 0.03 0.08 0.23
    C V (%) 6.00 5.33 3.86 6.00 5.33 4.79

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 94-107 101
    EDTA plasma (n=5) 85-98 91
    Cell culture media (n=5) 95-109 102

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 94-108 88-104 83-97
    Average (%) 102 95 90
    1:4 Range (%) 98-114 88-101 93-106
    Average (%) 106 93 99
    1:8 Range (%) 93-110 86-98 96-112
    Average (%) 101 91 104
    1:16 Range (%) 100-116 84-97 95-107
    Average (%) 108 90 102

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟

    2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

    3. 弃掉板内液体,洗板3次

    4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

    5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

    6. 每孔加入50μL终止液

    7. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. Insulinotropic Effect of S-Allyl Cysteine in Rat Pups.
      IF: /
      Journal: Preventive nutrition and food science(2018)
      DOI: 10.3746/pnf.2018.23.1.15
      PMID: 29662843
      引用产品: E-EL-R0582c 
      样本类型: Plasma
      物种: Rat
    2. Combined Treatment with Interlukin-1 and Tumor Necrosis Factor-Alpha Antagonists Improve Type 2 Diabetes in Rats.
      IF: 1.822
      Journal: Canadian Journal of Physiology and Pharmacology(2018)
      DOI: 10.1139/cjpp-2017-0769
      引用产品: E-EL-R0582c E-EL-R0614c 
      物种: Rat
    3. Effect Of Neonatal Orally Administered S-allyl Cysteine In High-Fructose Diet Fed Wistar Rats.
      IF: 2.07
      Journal: Journal of Developmental Origins Of Health And Disease(2017)
      DOI: 10.1017/S2040174417000940
      PMID: 29151399
      引用产品: E-EL-R0582c 
      样本类型: Plasma
      物种: Rat
    4. The Adverse Effects Of Chronic Low-Dose Exposure To Nonylphenol On Type 2 Diabetes Mellitus In High Sucrose-High Fat Diet-Treated Rats.
      IF: 2.2
      Journal: Islets(2017)
      DOI: 10.1080/19382014.2017.1404211
      PMID: 29215945
      引用产品: E-EL-R0582c 
      样本类型: Plasma
      物种: Rat
    5. In Utero Exposure To Germinated Brown Rice And Its Oryzanol-Rich Extract Attenuated High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In F1 Generation Of Rats.
      IF: 2.288
      Journal: BMC Complementary and Alternative Medicine(2017)
      DOI: 10.1186/s12906-017-1571-0
      PMID: 28109299
      引用产品: E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    6. Perinatal Exposure To Germinated Brown Rice And Its Gamma Amino-Butyric Acid-Rich Extract Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In First Generation Rat Offspring.
      IF: 2.039
      Journal: Food & Nutrition Research(2016)
      DOI: 10.3402/fnr.v60.30209
      PMID: 26842399
      引用产品: E-EL-0041c E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    7. Effect Of Glycine On Adipocyte Hypertrophy In A Metabolic Syndrome Rat Model.
      IF: 2.516
      Journal: Current Drug Delivery(2016)
      DOI: 10.2174/156720181301160314151554
      PMID: 26996629
      引用产品: E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    8. Curcumin Ameliorates HighFat DietInduced Spermatogenesis Dysfunction.
      IF: 1.692
      Journal: Molecular Medicine Reports(2016)
      DOI: 10.3892/mmr.2016.5712
      PMID: 27600729
      引用产品: E-EL-0150c E-EL-0155c E-EL-R0391c E-EL-R0026c E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    9. Curcumin Ameliorates High-Fat Diet-Induced Spermatogenesis Dysfunction.
      IF: 1.692
      Journal: Molecular Medicine Reports(2016)
      DOI: 10.3892/mmr.2016.5712
      PMID: 27600729
      引用产品: E-EL-0150c E-EL-0155c E-EL-R0391c E-EL-R0026c E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    10. Changes Of Adipocytokine Expression After Diabetic Rats Received Sitagliptin And The Molecular Mechanism .
      IF: 0.925
      Journal: Asian Pacific Journal of Tropical Medicine(2016)
      DOI: 10.1016/j.apjtm.2016.07.014
      PMID: 27633305
      引用产品: E-EL-R2492c E-EL-R0689c E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    11. Edible Bird'S Nest Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In Rats.
      IF: 2.717
      Journal: Journal of Diabetes Research(2015)
      DOI: 10.1155/2015/760535
      PMID: 26273674
      引用产品: E-EL-R0582c E-EL-0041c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    12. N-Acetylneuraminic Acid Attenuates Hypercoagulation On High Fat Diet-Induced Hyperlipidemic Rats.
      IF: 2.039
      Journal: Food & Nutrition Research(2015)
      DOI: 10.3402/fnr.v59.29046
      PMID: 26642300
      引用产品: E-EL-R0582c E-EL-R0710c E-EL-R1079c E-EL-0022c E-EL-R0965c E-EL-R0966c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    13. N-Acetylneuraminic Acid Supplementation Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In Rats Through Transcriptional And Nontranscriptional Mechanisms.
      IF: 2.476
      Journal: BioMed Research International(2015)
      DOI: 10.1155/2015/602313
      PMID: 26688813
      引用产品: E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    14. N-Acetylneuraminic Acid Attenuates Hypercoagulation On High Fat Diet-Induced Hyperlipidemic Rats.
      IF: 2.039
      Journal: Food & Nutrition Research(2015)
      DOI: 10.3402/fnr.v59.29046
      PMID: 26642300
      引用产品: E-EL-R0582c E-EL-R0710c E-EL-R1079c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    15. Edible Bird’S Nest Attenuates Procoagulation Effects Of High-Fat Diet In Rats.
      IF: 2.822
      Journal: Drug Design(2015)
      DOI: 10.2147/DDDT.S87772
      PMID: 26251574
      引用产品: E-EL-R0710c E-EL-R0965c E-EL-R0966c E-EL-R0582c E-EL-R1079c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    16. Edible Bird'S Nest Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In Rats.
      IF: 2.717
      Journal: Journal of Diabetes Research(2015)
      DOI: 10.1155/2015/760535
      PMID: 26273674
      引用产品: E-EL-R0582c E-EL-0041c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
    17. Protective Effects Of Metformin On Reproductive Function In Obese Male Rats Induced By High-Fat Diet.
      IF: 2.163
      Journal: Journal of Assisted Reproduction & Genetics(2015)
      DOI: 10.1007/s10815-015-0506-2
      PMID: 26081124
      引用产品: E-EL-0150c E-EL-0155c E-EL-R0391c E-EL-R0026c E-EL-R0582c 
      样本类型: Serum
      物种: Rat
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