• 本公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断

TUNEL Assay Kit (Enhance FITC)[334]

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    产品货号:E-CK-A334

    中文名:TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(增强型绿光,通用型)

    规格:
    • 20T
    • 50T
    • 100T
    数量:
    - +
    价格: ¥1750

    产品简介

    Elabscience® TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是一种高灵敏度且快速简便的细胞凋亡检测方法。检测结果可通过荧光显微镜直接观察。

    本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片、爬片)的原位凋亡检测。


    检测原理

    细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,剪断核小体间的基因组DNA,暴露的3’-OH可在末端脱氧核酸转移酶(TdT)的催化下加上荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP),即可通过荧光显微镜直接观察。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被标记。这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

    试剂盒中的增强型荧光标记液,包含FITC-12-dUTP和荧光增强型因子,荧光增强因子与FITC非共价结合,增强稳定性并放大信号,使标记的荧光更亮且抗猝灭能力更强。


    试剂盒组成

    产品编号

    成分

          20 T

    50 T

       100 T

         Storage

     E-CK-A334A

     平衡液(5×)

          700 μL

      900 μL × 2

         3.6 mL

    -20°C

     E-CK-A334B

     TdT

       20 μL

    50 μL

         100 μL

    -20°C

     E-CK-A334C

     蛋白酶K(100 ×)

        20 μL

    50 μL

         100 μL

    -20°C

     E-CK-A334D

     增强型荧光标记液

         100 μL

    250 μL

         500 μL

    -20°C

     E-CK-A334E

     DNase I(2 U/μL)

       5 μL

    13μL

           25 μL

    -20°C

     E-CK-A334F

     DNase I Buffer(10 ×)

         100 μL

    250 μL

       500 μL

    -20°C

        说明书

    一份



    自备试剂

    1、细胞样本

    固定液(4%多聚甲醛溶于PBS中,推荐使用Elabscience®E-IR-R113)。

    通透液(0.1%的Triton-100溶于0.1%柠檬酸钠,推荐使用Elabscience®E-IR-R122)。

    2、石蜡切片

    二甲苯、乙醇、PBS(推荐使用Elabscience®E-BC-R187)。

    3、冰冻切片

    固定液(4%多聚甲醛溶于PBS中,推荐使用Elabscience®E-IR-R113)。

    4、其他试剂 

        PBS、ddH2O、DAPI(推荐使用Elabscience®E-BC-R187)、含抗荧光淬灭剂的封片液(推荐使用Elabscience®E-IR-R119)。


    产品使用说明

    蛋白酶K(100 ×)[ E-CK-A334C]为浓缩液,实验前用PBS稀释成1×蛋白酶K工作液。

    例如,取1 μL蛋白酶(100 ×) [E-CK-A334C],加入到99 μL的PBS中,混匀即为1×蛋白酶工作液。

     

    保存条件

    -20°C 保存。增强型荧光标记液[E-CK-A334D]需避光保存。



    注意事项

    1.  保质期1年。为获得最佳的使用效果,请在3~6个月内使用。

    2.  TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂。一方面可以把凋亡和坏死细胞区分开,另一方面不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。

    3.  PBS清洗样本后,请尽量除去PBS溶液后再进行下一步操作。

    4.  实验过程中请保持样本的湿润,防止干片造成的实验失败。

    5.  TdT酶工作液现配现用,短暂于冰上保存,长期保存会导致酶失活影响实验结果。

    6.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    7.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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    Verified Customer

    z***hSubmitted [ Dec 04 2019 ]

    • Application:FCM
    • Sample:cell
    • Incubation:Undiluted

      Time: 1hours

    • Description:This product is very good, the separation of positive cells and negative cells is good and i can get the desired results very well
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