elabscienceelabscience

全部分类

  • 全部分类
  • 流式抗体
  • ELISA试剂盒
  • 磁珠分选
  • 抗体及相关试剂
  • 细胞状态检测
  • 细胞代谢检测试剂盒
  • 免疫测定试剂盒与试剂
  • 细胞鉴定
  • 蛋白
请输入货号/产品关键词 !
插入特殊字符:
  • α
  • β
  • γ
  • δ
  • ε
  • ζ
  • η
  • θ
  • κ
  • μ
  • ω
  • σ
  • τ
  • λ
  • ⅩⅢ
  • ⅩⅢ
  • ⅩⅣ
  • ⅩⅤ
  • ⅩⅦ
  • ⅩⅧ
  • 收起 ↑
热门搜索: 最新活动 文献引用 新品速递 一步法ELISA 流式抗体 铜死亡 Annexin V凋亡检测 TUNEL凋亡检测 未包被ELISA 铁死亡 双硫死亡

免疫荧光实验指南

Source: Elabscience®Published: 2017-09-02

固定和透化

1.   在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用1 × PBS浸洗3次,每次3 min。

2.   用4%的多聚甲醛固定爬片15 min,1 × PBS浸洗玻片3次,每次3 min。

3.   0.5% Triton X-100(1× PBS配制 )室温通透细胞15 min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤), 1 × PBS浸洗玻片3次,每次3min。

封闭

4. 吸水纸吸干1 ×PBS,在玻片上滴加5%的正常血清(与二抗种属来源一致或相似),室温封闭1 h。

抗体孵育

5.    吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4 ℃孵育过夜。

6. 加荧光二抗: PBST 浸洗爬片3次,每次3 min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中37℃孵育1 h,PBST浸洗爬片3次,每次3 min。

注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。

固定拍照

7.    复染核:滴加DAPI避光孵育5 min,对标本进行染核,PBST 5 min×4次洗去多余的DAPI。

8.    用吸水纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,在荧光显微镜下观察采集图像。


免疫荧光常见问题分析

免疫荧光试剂盒操作指南

微信客服 微信客服 联系我们 TOP