快过年啦,赶紧用流式来看看,你买的肉新鲜吗?
Source: Elabscience®Published: 2023-01-12
除夕将近,相信大家都准备了不少年货。年夜饭桌上无肉不欢,“肉”是年货中必不可少的部分,可是怎样才能买到新鲜的肉呢?
大家常用的方法,应该是“望闻问切”:
望——看肉的颜色是否正常(红光灯一开,隔夜肉秒变光鲜亮丽)×
闻——闻闻肉臭没 (菜市场人多味杂,狗鼻子也能失灵)×
问——问问老板肉新鲜不(老板:你猜我怎么回答?)×
切——摸摸手感(嗯……是块肉不假)×
正所谓“买的没有卖的精”,这些常规的鉴别方法,早就被精明的肉铺老板破解了。今天,就传授给大家肉质鉴定的最高奥义——流式大法!
秘籍如下:
检测原理
Calcein AM本身无荧光,进入细胞后,被细胞中的内源性酯酶水解,生成具有强负电荷且不能通过细胞膜的极性分子Calcein,滞留在细胞内,Calcein可发出强绿色荧光(Ex/Em=490nm/515nm)。
由于死细胞缺乏酯酶,不能或很少能产生Calcein,仅活细胞会被染色为强绿色荧光,死细胞则不能被染色,或染色非常弱;而碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)(Ex/Em= 535nm/617nm)不能穿透活细胞的细胞膜,只能染色细胞膜完整性被破坏的死细胞——Calcein AM与碘化丙啶联合使用,能对活细胞和死细胞进行很好的区分,通过对死/活细胞比例的分析,就能分辨出我们拿到的食材是否新鲜。
用料
◆ 流式细胞仪×1台
◆ Calcein AM/PI Double Staining Kit ×1盒
◆ 肉×1块
做法
1. 将肉制成单细胞悬液;
2. 加入Calcein AM/PI染色工作液,室温避光孵育15-20min;
3. 流式细胞仪上机检测。
仅需3步,就能让变质肉立即显形:
为了让大家更直观地看清楚,咱们使用小鼠脾脏做了新鲜样本和4℃放置3天样本的对比实验。从实验结果可以看出,新鲜脾脏中活细胞的占比为91.35%,4℃放置3天的脾脏中活细胞占比仅为46.06%,活细胞数量明显下降,新鲜程度大不如前。
当然啦,您购买的鸡鸭鱼肉是否新鲜,都可以使用这一方法来检验。通过咱们的Calcein AM/PI流式大法,立马就能让“变质肉”无所遁形。各位小伙伴,赶紧拿上您的流式细胞仪和相关试剂,亲手去试试吧!
本文中所提及的Calcein AM/PI Double Staining Kit ←点击查看