细胞外酸化率与氧消耗率检测常见问题解答
Source: Elabscience®Published: 2024-06-13
导语
Elabscience®——细胞代谢检测领导品牌，关注细胞检测工具开发应用，解决客户面临的痛点与难点。近期我们上线了能量代谢系列中细胞有氧呼吸与无氧呼吸检测产品，细胞外酸化率(ECAR)荧光法测试盒（E-BC-F069）与氧消耗率(OCR)荧光法测试盒（E-BC-F068），两个新品都是通过动态检测荧光值变化来反映细胞样本呼吸状态变化。
产品上线后，受到科研人员的广泛关注，针对大家在使用这两款产品时提出的疑问，今天我们特别准备了详细的介绍，包括试剂盒的背景原理、实验操作、结果处理与计算方法，期待本期内容能助您在实验中更加得心应手。
检测背景介绍
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细胞外酸化率(ECAR)荧光法测试盒与氧消耗率(OCR)荧光法测试盒都是通过优化的荧光探针为检测主体进行检测，试剂加入细胞培养环境后，探针不进入细胞，检测细胞外环境变化。
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检测原理：使用带有荧光检测、恒温功能的酶标仪，通过动力学检测出单位时间段内荧光信号变化。
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信号变化情况：
·随细胞外酸化进行，细胞外酸化探针荧光信号降低（E-BC-F069）；
·随细胞呼吸耗氧进行，氧浓度减少，细胞外耗氧探针荧光值增加（E-BC-F068）。
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样本适用性：贴壁细胞、提取的线粒体、悬浮细胞等。
实验操作疑问解答
Q
检测细胞外酸化率，细胞样本接种后，加入试剂一(Saline Solution)孵育可以在CO2培养箱中培养吗？
A
不建议，CO2会部分进入试剂一中，干扰酸化检测过程。
Q
检测细胞耗氧率时，荧光酶标仪可以选择顶部读数吗？
A
不建议，氧消耗率(OCR)荧光法测试盒（E-BC-F068）检测过程中会采用油封方式，顶部油层会影响检测结果，建议使用黑色透底酶标板进行底部读数检测。
Q
检测过程可以将酶标板拿出来吗？
A
不可以，细胞外酸化与细胞耗氧检测过程对环境变化比较敏感，酶标板拿出可能会造成检测结果的波动。
数据处理与分析
以氧消耗率(OCR)荧光法测试盒（E-BC-F068）为例（仅供参考）。
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整理相关实验数据（下图为动力学每隔10 min检测1次，实际操作建议每隔2~5 min检测1次）：
②
选取检测时间与荧光检测值结果制作曲线：
③
选取荧光值与时间线性段计算斜率(斜率代表有氧呼吸能力)：
④
计算线性段斜率并作图：
相关产品
产品名称 | 检测仪器 | 货号 |
氧消耗率(OCR)荧光法测试盒 | 荧光酶标仪 | E-BC-F068 |
细胞外酸化率(ECAR)荧光法测试盒 | 荧光酶标仪 | E-BC-F069 |
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