免疫细胞 | 流式多因子检测：多指标检测新纪元
Source: Elabscience®Published: 2024-08-13
细胞因子是一类具有广泛生物学活性的小分子，包括白介素、肿瘤坏死因子、干扰素、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。流式多因子检测技术具有高效率和精确性的特点，是疾病诊断和免疫研究的有力工具。
一、 细胞因子的功能
细胞因子主要由免疫细胞分泌，并具有调节先天免疫和适应性免疫、免疫细胞生成以及损伤组织修复等多种功能。多种疾病进程中，在评估免疫系统及免疫细胞的功能时，细胞因子具有重要的参考作用。例如，在新冠重症患者体内检测到的炎症因子风暴，促炎性细胞因子包括IL-2、IL-7、IL-10、IP10、MCP1、MIP1A、TNF-α等均升高。在评估Th1/Th2/Th17等T细胞亚群的功能时，也需要检测包括IL-2、IL-5、IL-4、IL-17、IFN-γ等细胞因子的表达量变化。
二、 流式多因子检测
流式多因子检测技术是综合应用流式细胞术和基于微球的检测技术发展而来的、可同时进行多指标检测的免疫检测技术。根据微球制备技术和所使用的流式细胞仪的不同，流式多因子检测技术主要分为基于Luminex平台开发和基于传统流式细胞仪开发的多因子检测技术。与传统的定量检测技术（如ELISA）相比，流式多因子检测技术具有高通量、低样本损耗、多种样本类型兼容、高灵敏度、宽检测范围和可变检测指标组合等优点。
流式多因子检测试剂盒基于夹心法免疫检测原理，利用不同大小、不同荧光编码的偶联有捕获抗体的微球混合物对待检样品中底物进行捕获。随后特异性的检测抗体混合物与捕获底物进行结合，检测抗体标记有荧光素或生物素。对于生物素标记的检测抗体，还需要与标记有荧光素的链霉亲和素进行孵育，以进行最终信号的读取。多因子检测在流式细胞仪上进行，通过区分不同的微球读取各待测指标的信号（平均荧光强度），各信号对应的数据可用于后续的指标定量分析。
图1. 人Th1/Th2多因子试剂盒中捕获微球混合物可通过流式细胞仪进行区分
三、 使用流式多因子技术检测细胞因子
随着对免疫系统、免疫细胞作用机制及疾病发生进程研究的深入，多细胞因子的联合检测成为科研工作者和细胞治疗相关产业的共同需求。若使用单因子检测手段（如ELISA）进行指标的定量，则需对每一指标单独进行检测，实验耗时长且样本量使用量大，无法满足高通量检测，也无法避免样本量限制。流式多因子检测技术可同时避免上述缺点，而且检测灵敏度更高，因此是更具性价比的产品选择。同时Elabsceince®可提供试剂盒定制服务，用户可以根据自身实验需要定制个性化的产品。
部分可组合的细胞因子展示如下：
反应性 | 规格 | 组合 | 指标汇总 |
Human | 96 T | Th1/Th2/Th17/Inflammation | IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5 IL-6, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, IL-17F, IL-21, IL-22, IL-27, IL-31, IL-33, IP-10, MCP-1, MIP-1α, TNF-α, TNF-β, TSLP, GM-CSF |
Mouse | 96 T | Th1/Th2/Th17/Inflammation | IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-17A, IL-21, IL-22, IL-23, IP-10, KC, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, RANTES, TNF-α |
NHP | 96 T | Th1/Th2/Th17/Inflammation | IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17A, TNF-α |
Rat | 96 T | Th1/Th2/Th17/Inflammation | IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A, TNF-α |
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