与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
反应类型 | 双抗体夹心法ELISA |
规格 | 96T/48T |
反应时间 | 2.5 h |
反应性 | 人 |
检测方法 | 比色法 |
检测范围 | 1.56-100 ng/mL |
灵敏度 | 0.30 ng/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清,血浆 |
特异性 | 可检测样本中的人 ALB , 且与其它类似物无明显交叉反应。 |
重复性 | 板内,板间变异系数均<10%。 |
用途 | 该试剂盒用于体外定量检测人 血清,血浆中ALB浓度。其它相关生物液体请咨询技术支持。 |
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 ALB抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)及生物素化的抗人 ALB抗体同时加入酶标板中,样本(或标准品)中的人 ALB会与包被抗体结合,同时抗人 ALB抗体与结合在包被抗体上的人 ALB结合,游离的成分被洗去。再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ALB浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中ALB的浓度。
未拆封的试剂盒可在2-8℃ 保存6个月;试剂盒组分开封后请按照下表中的条件分别保存。
中文名称 | 规格 | 开封后保存条件 |
---|---|---|
ELISA 酶标板 |
96T:8 孔×12 条 48T:8 孔×6 条 |
|
冻干标准品 |
96T:2 支 48T:1 支 |
2-8℃,复溶后当天使用 |
标准品&样品稀释液 | 1瓶 20mL | 2-8℃ |
生物素化抗体工作液 | 1瓶 6mL | |
酶结合物稀释液 | 1瓶 14mL | |
浓缩洗涤液 | 1瓶 30mL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) |
96T:1支 120μL 48T:1支 60μL |
2-8℃ (避光) |
底物溶液(TMB) | 1瓶 10mL | |
反应终止液 | 1瓶 10mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | 5张 | |
产品说明书 | 1 份 | |
质检报告 | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。试剂体积以实际发货版说明书为准。 相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线 。
浓度:ng/mL | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0 |
OD | 2.618 | 2.044 | 1.412 | 0.872 | 0.598 | 0.38 | 0.219 | 0.078 |
校正OD | 2.54 | 1.966 | 1.334 | 0.794 | 0.52 | 0.302 | 0.141 | - |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
批内变异系数 | 批间变异系数 | |||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
数量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
平均值(ng/mL) | 4.06 | 10.37 | 43.36 | 4.47 | 10.60 | 44.40 |
标准差 | 0.24 | 0.48 | 1.99 | 0.25 | 0.52 | 1.84 |
变异系数 (%) | 5.91 | 4.63 | 4.59 | 5.59 | 4.91 | 4.14 |
分别往不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率 。
样本类型 | 回收率范围 (%) | 平均回收率 (%) |
血清(n=8) | 87-101 | 95 |
血浆(EDTA)(n=8) | 94-108 | 102 |
分别往4个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将4个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率 。
血清(n=4) | 血浆(EDTA) (n=4) | ||
1:2 | 回收率范围(%) | 100-108 | 89-98 |
平均回收率(%) | 104 | 93 | |
1:4 | 回收率范围(%) | 90-101 | 98-106 |
平均回收率(%) | 94 | 101 | |
1:8 | 回收率范围(%) | 93-102 | 93-108 |
平均回收率(%) | 97 | 101 | |
1:16 | 回收率范围(%) | 96-110 | 93-104 |
平均回收率(%) | 102 | 101 |
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1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37°C孵育90分钟 |
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2. 弃掉板内液体,洗板3次 |
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3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37°C孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
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4. 每孔加入90μL底物溶液,37°C孵育15分钟左右 |
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5. 每孔加入50μL终止液 |
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6. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
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