超滤管的使用及注意事项

1. 超滤管的应用
①  浓缩或纯化生物样本。

②  纯化组织培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分，去除反应液中的引物、接头或分子标记，在HPLC前去除蛋白质。

③  除盐，缓冲液更换，或渗滤。

2. 超滤管使用

①  预处理：

新超滤管：使用前用纯水浸泡，冰箱预冷10 min。然后将水倒出，置于冰上预冷2-5 min，加样。

旧超滤管：倒出管内的乙醇浸泡液，用纯水冲洗干净10遍(注意水流速尽量平缓，防止冲破滤膜)，置于冰上预冷2-5 min，加样。

②  加样：

如超滤管中有少许残留水可将超滤管内管倒置1000×g离心1 min，移液枪移取适量样本加入超滤管中。

③  离心：

配平，12000 ×g离心（15-30 min），等达到目的转速后方可离开。

④  样本收集 ：

        外管滤液为除去部分蛋白的样本上清，如需取浓缩后样本用于其他实验，则另取外管，内管倒置，1000×g离心1-2 min。

⑤  超滤管清洗

使用完的超滤管用纯水反复清洗5次，再用75%乙醇冲洗3次。

3. 存放与保存

①  短时间存放与保存：0.1 M的NaOH浸泡1-2 h，纯水清洗，然后用75%乙醇浸泡，务必使滤膜保持湿润，不能长菌。

②  长时间放置超滤管处理：0.1 M的NaOH浸泡1-2 h，纯水清洗，然后用20%乙醇浸泡，务必使滤膜保持湿润，不能长菌。

4. 注意事项
①  超滤管最大离心力不能超过12000g ，否则会导致滤膜破损。

②  超滤样本会损失五分之一至二分之一的样本量，主要取决于样本中蛋白含量。

③  若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入纯水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲。

④  超滤管内管不能用烘箱进行烘干。