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双抗体夹心法ELISA操作视频

Source: Elabscience®Published: 2016-10-26

本视频为Elabscience®公司ELISA试剂盒(双抗体夹心法)的操作指南,对每一步的反应都做了演示,以便实验者能更好地理解ELISA实验的过程。

夹心法原理:

用特异性抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的特异性抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。生物素化的特异性抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中抗原的浓度。


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