文献解读 | Elabscience助力客户发表自身免疫性脑脊髓炎小鼠的认知功能障碍机制

武汉大学基础医学学院何小华教授团队近日在国际顶级期刊Cell Death and Disease上发表最新研究成果，揭示NLRP3炎性体的抑制作用通过改变星形胶质细胞表型来预防实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的认知功能障碍机制，为自身免疫性脑脊髓炎和多发性硬化症中的海马体损伤提供了一种新的治疗策略。

祝贺何小华教授及其团队在顶级期刊Cell Death and Disease发表突破性研究成果！Elabscience®亦非常荣幸能为这一具重大突破意义的研究助力！

基本信息

文章题目：Inhibition of the NLRP3-inflammasome prevents cognitive deficits in experimental autoimmune encephalomyelitis mice via the alteration of astrocyte phenotype

中文题目：NLRP3炎性体的抑制作用通过改变星形胶质细胞表型来预防实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的认知功能障碍

期刊：Cell Death and Disease

影响因子：6.28 (2019)

第一作者单位：武汉大学基础医学学院，病理学与病理生理学

通讯作者单位：武汉大学基础医学学院，病理学与病理生理学

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多发性硬化症是一种慢性疾病，其特征在于中枢神经系统发生脱髓鞘和轴突损伤。认知缺陷被认为是多发性硬化症的特征之一，这些缺陷会影响患者的生活质量。多发性硬化症的动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎的越来越多的证据表明，自身免疫性脑脊髓炎小鼠表现出海马体损伤和认知缺陷，但其潜在机制仍不清楚。

NLRP3炎性小体是神经发炎的关键因素，并参与多发性硬化症和自身免疫性脑脊髓炎的发展。小胶质细胞中NLRP3炎性小体的激活对于随后的炎症事件至关重要。活化的小胶质细胞可以将星形胶质细胞转化为多种神经系统疾病中的神经毒性A1型。然而，尚不清楚NLRP3炎性体是否会导致自身免疫性脑脊髓炎中的认知缺陷和星形胶质细胞表型改变。

严重的记忆缺陷发生在自身免疫性脑脊髓炎的晚期，并且通过使用MCC950（一种NLRP3炎性体的抑制剂）治疗可以改善认知缺陷。

MCC950减轻了海马病理和突触损失。将来自自身免疫性脑脊髓炎小鼠的星形胶质细胞转化为具有神经毒性的A1型，并通过MCC950处理阻止了这种转化。

IL-18是NLRP3炎性小体的下游，足以通过NF-κB途径诱导星形胶质细胞转化为A1型。IL-18诱导的A1型反应性星形胶质细胞通过释放补体成分3 （C3）损害海马神经元。

NLRP3炎性小体可能通过星形胶质细胞表型的改变在自身免疫性脑脊髓炎的认知缺陷中起重要作用。

1.在实验中，使用了NLRP3的选择性抑制剂MCC950来研究EAE小鼠在高峰期海马体中NLRP3炎性小体的活化，同时用CD45（一种特定的巨噬细胞标记物）和识别炎性体成分ASC的抗体免疫荧光。

2.检测MCC950对自身免疫性脑脊髓炎严重性的影响，在后期，进行莫里斯水迷宫测试和恐惧条件测试，进一步评估自身免疫性脑脊髓炎小鼠的认知。

3.通过HE和Nissl染色，评估行为实验第46天后NLRP3炎性小体对海马病理的影响。

4.使用IHC和WB来评估自身免疫性脑脊髓炎模型中星形胶质细胞表型的变化。

5.培养原代小鼠星形胶质细胞并用100 ng/mL和500ng/mL的IL-18进行处理，进行qPCR检测。

6.在不同的星形胶质细胞培养基中培养原代海马体神经元，使用IF和WB通过突触前和突触后的标记量化了突触的密度。

1.小胶质细胞和NLRP3炎性小体在自身免疫性脑脊髓炎小鼠的海马中被激活，而用MCC950预处理可抑制小胶质细胞和NLRP3炎性小体的激活。

2.NLRP3炎性小体参与了自身免疫性脑脊髓炎动物认知功能障碍的发病机理，并且用NLRP3抑制剂进行预处理可以显着改善自身免疫性脑脊髓炎相关的认知功能障碍并减轻海马病理。

3.星形胶质细胞在自身免疫性脑脊髓炎小鼠中被转化为具有神经毒性的A1反应性星形胶质细胞，并且该过程受NLRP3炎性小体的调节。

4.IL-18可能充当A1反应性星形胶质细胞的新诱导因子。

5.NLRP3炎性小体被激活并有助于自身免疫性脑脊髓炎小鼠的认知缺陷，并且它可能通过调节星形胶质细胞表型改变起作用。