针对同一指标，代谢测定试剂盒和ELISA试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？

一、两种方法检测原理

两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。

1) 代谢测定试剂盒检测原理

代谢测定试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示：

延迟区：无规律可寻。

等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。

过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。

平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。

目前，我公司的代谢测定试剂盒采用的原理为：可见区的显色反应和紫外区的某一物质变化量。某物质与显色剂反应后，形成区别于自身的颜色反应，在某一波长下，吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系，其显色反应的示意图如下：

代谢测定结果的表现形式：

① 物质浓度：单位主要是mg/L、mmol/L、μmol/mgprot等

② 某种能力和活力：世界上没有真实物质存在，以另一真实存在的物质变化量来表示其能力大小;其单位为U/L、U/gprot等。例如酶活的单位：在特定条件下，每分钟内转化1 μmol底物的酶量为一个单位(U)，或者转化1 μmol的有关基团的酶量。

2) ELISA试剂盒检测原理

ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法(图A)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图B)等等。

图A 图B

抗体的特异性产生是由于抗原决定簇决定，抗体产生的过程也比较复杂，特别是小分子抗原必须偶联到载体蛋白上才能产生抗体。

ELISA测定结果的表现形式:

物质浓度：单位主要是μg/mL。

二、从微观角度来看

某一物质的抗原决定簇的活性位点(或者抗原抗体特异性结合位点)，与化学反应的活性位点可能存在差异。

三、总的来看

针对同一指标，生化试剂盒和ELISA试剂盒的检测结果趋势是正相关、负相关还是不相关的问题，需要更高技术设备和方法，以及大量的实验数据来验证。从原理中也说明了ELISA试剂盒分种属，而生化试剂盒不分种属的问题。