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DAB Detection Kit

中文名称:DAB显色试剂盒
DAB Detection Kit
  • DAB Detection Kit

Price: ¥720.00 ¥400.00 ¥150.00

Size:
6mL 3mL 1mL
  • 应用性: IHC
产品简介 DAB即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride,是辣根过氧化物酶(HRP)的常用底物,在辣根过氧化物酶的催化下,DAB会产生棕色沉淀。
保存条件
2~8°C避光保存,不得冻存,有效期12 个月。 使用时即拿即放,单支试剂使用后应立即放回冰箱,开封后试剂有效期 6 个月。
注意事项 1. 本显色液主要用于免疫组化显色,不推荐用于其他实验用途。
2. 本染色液仅限专业人员使用。
3. DAB 为联苯偶氮类染料,为可疑致癌物,使用过程中请穿实验服并戴一次性手套防护。
4. 滴加适量新鲜配制的 DAB 显色工作液,室温孵育 5~10 分钟。控制好 DAB 显色时间,阳性信号为 棕黄色或褐黄色,切勿显色过深。
5. 蒸馏水冲洗切片终止显色后复染、脱水、透明、封片。
6. 为防止可能出现的假阳性、假阴性结果,在实验过程中请设置阳性与阴性对照。
7. 实验中滴加试剂时,PBS 缓冲液会导致试剂被稀释,将引起染色强度变弱,因此,滴加试剂前请除 去多余的缓冲液。

Q1:蛋白酶K使用时应该用什么溶液溶解?常用工作浓度是多少?需要在多少度下保存呢?

蛋白酶K有效pH范围为pH4.0~12.5,最佳pH范围为pH7.5-8.0。请根据实验需求尽量用上述适当pH的缓冲溶液,如:10mM Tris-HCl pH7.4-7.8,进行蛋白酶K溶液的配制。 蛋白酶K常用工作浓度为10~100ug/ml,储存液浓度一般为100~200mg/ml,-20℃保存,稀释至工作浓度后应尽快使用,避免长时间保存。

Q2:BSA做WB实验推荐什么浓度呢?

用TBST稀释,BSA浓度 2-5%。

Q3:跑胶结束后如何快速去除可能遮挡条带的溴酚蓝?

延长电泳时间可以使溴酚蓝与条带分开,对于小分子量蛋白建议更换浓度更适合的分离胶缓冲体系。

Q4:该产品对于蛋白浓度是否有要求?若蛋白浓度较高是否需要提高缓冲液的浓度?

本产品对蛋白浓度无具体要求,按比例稀释使用即可。

Q5:货号E-IR-R304A和E-IR-R304B的WB实验试剂盒里面是否包含E-IR-R305凝胶试剂?

E-IR-R305凝胶试剂盒是不包含在E-IR-R304A和E-IR-R304B里面的,需要单独购买凝胶试剂盒;

Q6:请问BSA室温下封闭多久?

封闭操作时间通常为1.5小时。

Q7:本产品在使用前需要额外添加巯基乙醇吗?

不需要,本产品中含有DTT,作用与巯基乙醇类似,起到还原剂的作用,同时毒性也更低。

Q8:RIPA lysis buffer未开封在室温下存放了24小时能否继续使用?反复冻融的次数有限制吗?

本产品在室温下(25℃左右)放置24小时对产品效果无明显影响,可继续使用。但建议收货后立即分装并于-20℃保存,反复冻融次数不超过5次。

Q9:裂解液想问一下PMSF 跟Na3VO4的作用是?还有这个产品是什么浓度,如何使用?

这两个都是酶的抑制剂,作用是预防蛋白的降解。 PMSF常作为蛋白酶抑制剂被应用在生化和分子生物学实验中,是丝氨酸蛋白酶的抑制剂,可抑制胰蛋白酶(trypsin),糜蛋白酶(chymotrypsin)和AChE的活性。 Na3VO4是磷酸酶抑制剂,抑制ATP酶、碱性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶。 试剂盒这两个产品是100X的,使用前按照1:100的比例加入到PIPA裂解液中。

Q10:请问这个上样缓冲液适用于所有的蛋白电泳体系吗?

本产品适用于变性电泳的各种电泳缓冲液体系。



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