DAPI Reagent (1 μg/mL)
中文名称：DAPI染色液
Price:
- 应用性： IF
| 产品简介 | DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用荧光显微镜观测。DAPI可以透过完整的细胞膜，可用于活细胞和固定细胞的染色。CAS Number 28718-90-3。
DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到呈蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100%) ，且DAPI对活细胞无毒副作用。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA着色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到细胞核的形态发生变化。 DAPI染色液的最大激发波长为340 nm，最大发射波长为488 nm，DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360 nm，最大发射波长为460 nm。 本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。 |
| 保存条件 | 2~8°C避光保存，有效期12个月。 |
| 注意事项 | 1.荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。 2.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。 3.使用过程中请穿实验服并戴一次性手套防护。 |
-
Transient transfection of the respiratory epithelium with gamma interferon for host-directed therapy in pulmonary tuberculosis
IF: 7.032 -
MiR-218 Promotes Adriamycin-Induced H9C2 Apoptosis by Inhibiting Stress-Associated Endoplasmic Reticulum Protein 1
IF: 3.434 -
Wound Healing Activity of the Flavonoid-Enriched Fraction of Selaginella bryopteris Linn. against Streptozocin-Induced Diabetes in Rats
IF: 3.344Journal：Separations
Q1:DAPI染完核后可以使用激光共聚焦λ=405nm激发吗？
可以。DAPI可以使用405纳米的激发光进行激发。虽然DAPI最佳的激发波长在紫外光区域（约350-360纳米），但它也能够在405纳米的蓝光下进行有效的激发。使用405纳米的激发光源仍然可以激活DAPI并产生蓝色荧光，用于观察和成像细胞核。
Q2:本产品可直接使用于贴壁细胞的染色吗？能否直接对活细胞进行染色，并通过染色情况判断细胞凋亡情况？
本产品仅适用于固定后细胞的染色，不建议直接对活细胞进行染色也不建议使用DAPI染色来判断细胞凋亡情况。若要对细胞进行凋亡情况的判断，建议使用专门的检测试剂盒，如TUNEL、Annexin V-FITC等。
Q3:可否用于非变性电泳？
不能，本产品含有DTT等还原剂，不可用于非变性电泳中。
Q4:请问RIPA蛋白裂解液100ul差不多裂解多少细胞？
大约可裂解1X 10^6个细胞，如果使用孔板操作，建议6孔板中每孔加入100-150 μL RIPA裂解液。
Q5:这款缓冲液主要成分有哪些呢？
本款产品中主要成分为Tris-HCl、溴酚蓝、SDS、DTT、甘油等。
Q6:裂解液裂解不开，加入ripa后震荡，然后冰上裂解20分钟再离心，得到的是一团粘稠的液体？
RIPA裂解液裂解细胞后，细胞核内的DNA比较完整的弥散到样本里，形成一团黏糊糊的液体，遇到这种情况裂解后可再超声处理，在35~40％的功率下，超声处理样本1 min（冰浴条件下进行），超声2 s，间隔2 s，确保细胞充分裂解，降低样本粘度。
Q7:细胞裂解液裂解细胞后续做免疫共沉淀可以吗?
不可以, 免疫共沉淀的细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液，常规的RIPA裂解含有SDS，会对蛋白产生变性作用，对蛋白间的相互作用有影响。做免疫共沉淀推荐使用不含变性剂的裂解液。
Q8:若要使用此TBS配制TBST，吐温需要加入多少的量呢？
使用本产品配制TBST时，控制吐温终浓度为0.1%即可。
Q9:裂解液不加矾酸钠可以用吗？
如果是做磷酸化抗体，是必须加矾酸钠抑制剂，如果是做的普通抗体可以只加PMSF（蛋白酶抑制剂）。
Q10:EDTA抗原修复液稀释后的pH需要再次进行调整吗？
本产品在使用时直接按说明书稀释至工作液浓度即可，无需额外调节pH值。
