Hematoxylin Staining Buffer
中文名称：苏木素染色液
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- 应用性： IHC
| 产品简介 | 苏木素染色液(Hematoxylin Staining Solution)综合了多种经典的苏木素染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。
苏木素染色，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。 本苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。 |
| 保存条件 | 室温避光保存，有效期12个月。 |
| 注意事项 | 1.染色后的分化为选做步骤，但分化后细胞核着色更清晰。 2.染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。 3.样品数量较多时，可以使染色架和染色缸，便于操作。 4.第一次使用本试剂盒时建议先取1~2个样品做预实验。 5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
Q1:此苏木素染色染液在使用时需要稀释吗？
本产品可直接用于染色，无需稀释。
Q2:发现该染液有沉淀产生，要怎么处理？如何判断染料是否失效呢？
若在实验前发现染液出现蓝色沉淀，可使用滤纸进行过滤后再使用。染液是否失效需要根据染色结果进行判断。
Q3:可否用于非变性电泳？
不能，本产品含有DTT等还原剂，不可用于非变性电泳中。
Q4:请问RIPA蛋白裂解液100ul差不多裂解多少细胞？
大约可裂解1X 10^6个细胞，如果使用孔板操作，建议6孔板中每孔加入100-150 μL RIPA裂解液。
Q5:这款缓冲液主要成分有哪些呢？
本款产品中主要成分为Tris-HCl、溴酚蓝、SDS、DTT、甘油等。
Q6:裂解液裂解不开，加入ripa后震荡，然后冰上裂解20分钟再离心，得到的是一团粘稠的液体？
RIPA裂解液裂解细胞后，细胞核内的DNA比较完整的弥散到样本里，形成一团黏糊糊的液体，遇到这种情况裂解后可再超声处理，在35~40％的功率下，超声处理样本1 min（冰浴条件下进行），超声2 s，间隔2 s，确保细胞充分裂解，降低样本粘度。
Q7:细胞裂解液裂解细胞后续做免疫共沉淀可以吗?
不可以, 免疫共沉淀的细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液，常规的RIPA裂解含有SDS，会对蛋白产生变性作用，对蛋白间的相互作用有影响。做免疫共沉淀推荐使用不含变性剂的裂解液。
Q8:若要使用此TBS配制TBST，吐温需要加入多少的量呢？
使用本产品配制TBST时，控制吐温终浓度为0.1%即可。
Q9:裂解液不加矾酸钠可以用吗？
如果是做磷酸化抗体，是必须加矾酸钠抑制剂，如果是做的普通抗体可以只加PMSF（蛋白酶抑制剂）。
Q10:EDTA抗原修复液稀释后的pH需要再次进行调整吗？
本产品在使用时直接按说明书稀释至工作液浓度即可，无需额外调节pH值。
