Human IFN-γ(Interferon Gamma) ELISA Kit
中文名称:人γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫吸附测定试剂盒
Price:
- 反应性: Human
- 检测范围: 15.63-1000 pg/mL
- 灵敏度: 9.38 pg/mL
产品应用 | ELISA |
检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IFN-γ抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的人IFN-γ会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗人IFN-γ抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人IFN-γ抗体与结合在包被抗体上的人IFN-γ结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,IFN-γ浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IFN-γ的浓度。 |
反应类型 | Sandwich-ELISA |
规格 |
96T
/ 48T
/ 96T*5
|
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Human |
检测方法 | 比色法;ELISA;夹心法 |
检测范围 | 15.63-1000 pg/mL |
灵敏度 | 9.38 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清,血浆,细胞上清,细胞提取液体,组织匀浆等其他生物体液 |
特异性 | 可检测样本中的人IFN-γ,且与其它类似物无明显交叉反应 |
精密度 | 板内,板间变异系数均<10% |
回收率 | 80%-120% |
储存条件 | 2-8℃/-20℃ |
数据处理 |
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Q1:组织/细胞样本处理中提到的“反复冻融”过程该如何操作?
组织样本:组织研磨后,将其-80℃放置1小时/液氮放置0.5小时,然后置于30℃水浴锅中轻微振荡使其迅速融化,此操作反复1-2次即可。 细胞样本:按上述冻融的操作反复2-3次。若为膜蛋白可以适当超声一下,但需要控制好超声的温度和频率。 样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂。常规推荐:PMSF(Cat.E-EL-SR002)。
Q2:试剂盒中铝箔袋、覆膜的用途是什么?
除了已真空封存酶标板的铝箔袋外,试剂盒内会附赠一个空的铝箔袋,客户可以将拆卸的酶标板条密封保存于新铝箔袋内并按照说明书要求存放组分。 覆膜是在孵育阶段用于密封板孔的粘性膜,能控制和减少孵育阶段水分的蒸发并更好地维持整板均匀受热,最大程度降低边缘效应对检测结果的影响。
Q3:ELISA试剂盒有哪些规格?
有96T/48T/24T/96T*5的四种规格。其中24T为试用装规格。
Q4:稀释方案
稀释100倍:一步稀释。取5μl样本到495μl标准品&样本稀释液内,做100倍稀释; 稀释1000倍:两步稀释。取5μl样本到95μl标准品&样本稀释液内,做20倍稀释,再取5μl 20倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释1000倍; 稀释100000倍:三步稀释。取5μl样本到195μl标准品&样本稀释液内,做40倍稀释,再取5μl 40倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,最后取5μl 2000倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释100000倍; 每步稀释时取液量不少于3μl,稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀,避免起泡。