Normal Rabbit Blocking Buffer (Ready-to-Use)
中文名称:即用型正常兔血清
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- 应用性: IHC;IF;FCM
产品简介 | 本兔血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。
在选择封闭用血清时,要注意血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的血清进行封闭。 |
保存条件 | 2~8°C保存,有效期12个月。 |
注意事项 | 1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
E-IR-R124 | Normal Rabbit Blocking Buffer (Concentrated) | 10mL , 5mL |
Q1:若蛋白含有高分子杂带,可能存在二聚体,是否需要加入倍量缓冲液以打开二聚体?
如果蛋白样品中含有比较多的二聚体,可以添加还原剂DTT以帮助打开二聚体。
Q2:可否用于非变性电泳?
不能,本产品含有DTT等还原剂,不可用于非变性电泳中。
Q3:EDTA抗原修复液稀释后的pH需要再次进行调整吗?
本产品在使用时直接按说明书稀释至工作液浓度即可,无需额外调节pH值。
Q4:请问RIPA蛋白裂解液100ul差不多裂解多少细胞?
大约可裂解1X 10^6个细胞,如果使用孔板操作,建议6孔板中每孔加入100-150 μL RIPA裂解液。
Q5:这款缓冲液主要成分有哪些呢?
本款产品中主要成分为Tris-HCl、溴酚蓝、SDS、DTT、甘油等。
Q6:裂解液裂解不开,加入ripa后震荡,然后冰上裂解20分钟再离心,得到的是一团粘稠的液体?
RIPA裂解液裂解细胞后,细胞核内的DNA比较完整的弥散到样本里,形成一团黏糊糊的液体,遇到这种情况裂解后可再超声处理,在35~40%的功率下,超声处理样本1 min(冰浴条件下进行),超声2 s,间隔2 s,确保细胞充分裂解,降低样本粘度。
Q7:若要使用此TBS配制TBST,吐温需要加入多少的量呢?
使用本产品配制TBST时,控制吐温终浓度为0.1%即可。
Q8:细胞裂解液裂解细胞后续做免疫共沉淀可以吗?
不可以, 免疫共沉淀的细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液,常规的RIPA裂解含有SDS,会对蛋白产生变性作用,对蛋白间的相互作用有影响。做免疫共沉淀推荐使用不含变性剂的裂解液。
Q9:裂解液不加矾酸钠可以用吗?
如果是做磷酸化抗体,是必须加矾酸钠抑制剂,如果是做的普通抗体可以只加PMSF(蛋白酶抑制剂)。
Q10:使用该4%多聚甲醛常温固定细胞15min后,细胞膜发生起泡现象,需要更换固定温度为4℃吗?
细胞膜发生起泡现象可能是由于固定时间过长所致,可以适当缩短固定时间,优化固定结果。