Proteinase K Lyophilized Powder
中文名称：蛋白酶k冻干粉
Price:
- 应用性： IF;FCM
| 产品简介 | 蛋白酶 K（Proteinase K）是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的降解。
可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验，例如基因组 DNA 抽提、酶的消化去除、细胞通透等。
酶活力>30 U/mg。在 37°C，以血红蛋白为底物，1 分钟内可以产生相当于 1 微摩尔酪氨酸 Folin 阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶 K 的量，定义为一个单位蛋白酶 K 酶活力。 蛋白酶 K 有效 pH 范围为 pH4.0~12.5，最佳 pH 范围为 pH7.5~8.0。 蛋白酶 K 的最佳反应温度为 65°C，但在 65°C 或更高的温度蛋白酶 K 自身的也非常迅速地降解。 建议最佳反应温度选择 50~55°C。 |
| 保存条件 | 室温或低温保存。2~8°C 有效期 12个月。 |
Q1:蛋白酶K粉末保存和称量时需要避光吗？
不需要。
Q2:蛋白酶K使用时应该用什么溶液溶解？常用工作浓度是多少？需要在多少度下保存呢？
蛋白酶K有效pH范围为pH4.0~12.5，最佳pH范围为pH7.5-8.0。请根据实验需求尽量用上述适当pH的缓冲溶液，如：10mM Tris-HCl pH7.4-7.8，进行蛋白酶K溶液的配制。 蛋白酶K常用工作浓度为10~100ug/ml，储存液浓度一般为100~200mg/ml，-20℃保存，稀释至工作浓度后应尽快使用，避免长时间保存。
Q3:使用该染液染色过后的胶能否兼容胶内酶解实验和质谱分析？
都可以兼容。
Q4:抗体去除液洗脱抗体时对温度是什么要求？同一张膜能否多次洗脱？
本产品使用时，将去除液恢复值室温时即可使用；同一张膜可进行抗体清除1~2次，通常以1次为宜。
Q5:若要使用此TBS配制TBST，吐温需要加入多少的量呢？
使用本产品配制TBST时，控制吐温终浓度为0.1%即可。
Q6:5X SDS上样缓冲液，上样缓冲液是不是还原型？如何稀释样本问题？
货号E-BC-R288上样缓冲液是还原型的，还原型的里面有加DTT。 关于蛋白样本是否需要稀释，需要根据BCA检测浓度后确定，如果提取蛋白浓度大于5 mg/mL可适当稀释，使用PBS稀释，使蛋白浓度在4-5 mg/mL左右再制样。如果提取的蛋白浓度低于5 mg/mL 可直接按说明书比例加loading buffer制样。
Q7:请问RIPA蛋白裂解液100ul差不多裂解多少细胞？
大约可裂解1X 10^6个细胞，如果使用孔板操作，建议6孔板中每孔加入100-150 μL RIPA裂解液。
Q8:BSA做WB实验推荐什么浓度呢？
用TBST稀释，BSA浓度 2-5%。
Q9:请问这个上样缓冲液适用于所有的蛋白电泳体系吗？
本产品适用于变性电泳的各种电泳缓冲液体系。
Q10:蛋白样本加好上样缓冲液后，95°C煮 10min，14000 离心后，上样前个别样品会出现分层，是什么原因啊？
上样缓冲液使用前需要充分混匀后再使用，样本和上样缓冲液也需要充分混匀，充分混匀后再煮沸变性可避免此类情况发生。
