Rat LEP(Leptin) ELISA Kit
中文名称:大鼠瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒
Price:
- 反应性: Rat
- 检测范围: 0.16-10 ng/mL
- 灵敏度: 0.1 ng/mL
产品应用 | ELISA |
检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠LEP抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的大鼠LEP会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗大鼠LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗大鼠LEP抗体与结合在包被抗体上的大鼠LEP结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,LEP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中LEP的浓度。 |
反应类型 | Sandwich-ELISA |
规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T * 5
|
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Rat |
检测方法 | 比色法;ELISA;夹心法 |
检测范围 | 0.16-10 ng/mL |
灵敏度 | 0.1 ng/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清、血浆、细胞上清、细胞提取液体、组织匀浆等其他生物体液 |
特异性 | 可检测样本中的大鼠LEP,且与其它类似物无明显交叉反应 |
精密度 | 板内,板间变异系数均<10% |
回收率 | 80%-120% |
储存条件 | 2-8℃/-20℃ |
数据处理 |
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Q11:ELISA实验是否需要设置复孔?
为了保证实验结果的准确性,建议标准品和样品都做复孔检测。当然,ELISA实验并非要求一定做复孔/3复孔,客户可根据自己的需求设置实验的复孔与否。
Q12:稀释方案
稀释100倍:一步稀释。取5μl样本到495μl标准品&样本稀释液内,做100倍稀释; 稀释1000倍:两步稀释。取5μl样本到95μl标准品&样本稀释液内,做20倍稀释,再取5μl 20倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释1000倍; 稀释100000倍:三步稀释。取5μl样本到195μl标准品&样本稀释液内,做40倍稀释,再取5μl 40倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,最后取5μl 2000倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释100000倍; 每步稀释时取液量不少于3μl,稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀,避免起泡。
Q13:ELISA试剂盒有哪些规格?
有96T/48T/24T/96T*5的四种规格。其中24T为试用装规格。
Q14:组织/细胞样本处理中提到的“反复冻融”过程该如何操作?
组织样本:组织研磨后,将其-80℃放置1小时/液氮放置0.5小时,然后置于30℃水浴锅中轻微振荡使其迅速融化,此操作反复1-2次即可。 细胞样本:按上述冻融的操作反复2-3次。若为膜蛋白可以适当超声一下,但需要控制好超声的温度和频率。 样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂。常规推荐:PMSF(Cat.E-EL-SR002)。