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Rat NOS3/eNOS(Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit

中文名称:大鼠内皮型一氧化氮合成酶(NOS3/eNOS)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:

Price: ¥2600 ¥1800 ¥11050

Size:
96T 48T 96T*5
  • 反应性: Rat
  • 检测范围: 15.63-1000 pg/mL
  • 灵敏度: 9.38 pg/mL
产品应用
ELISA
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠NOS3/eNOS抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的大鼠NOS3/eNOS会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗大鼠NOS3/eNOS抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗大鼠NOS3/eNOS抗体与结合在包被抗体上的大鼠NOS3/eNOS结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,NOS3/eNOS浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中NOS3/eNOS的浓度。
反应类型
Sandwich-ELISA
规格
96T / 48T / 96T*5
反应时间
3.5h
反应性
Rat
检测方法
比色法;ELISA;夹心法
检测范围
15.63-1000 pg/mL
灵敏度
9.38 pg/mL
样本体积
100μL
样本类型
血清,血浆,细胞上清,细胞提取液体,组织匀浆等其他生物体液
特异性
可检测样本中的大鼠NOS3/eNOS,且与其它类似物无明显交叉反应
精密度
板内,板间变异系数均<10%
回收率
80%-120%
储存条件
2-8℃/-20℃
操作步骤
数据处理

Q1:组织/细胞样本处理中提到的“反复冻融”过程该如何操作?

组织样本:组织研磨后,将其-80℃放置1小时/液氮放置0.5小时,然后置于30℃水浴锅中轻微振荡使其迅速融化,此操作反复1-2次即可。 细胞样本:按上述冻融的操作反复2-3次。若为膜蛋白可以适当超声一下,但需要控制好超声的温度和频率。 样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂。常规推荐:PMSF(Cat.E-EL-SR002)。

Q2:ELISA试剂盒有哪些规格?

有96T/48T/24T/96T*5的四种规格。其中24T为试用装规格。

Q3:为什么有些指标有两个货号的产品去测不同的样本类型呢?

各种样本类型的基质是不一样的,为了降低基质本身的影响并提高常规样本测值的准确性,通常会设定不同体系的ELISA试剂盒,并以不同的货号展示。另外,有些指标在不同样本间浓度差异很大,所以通过不同的产品来满足客户对于操作便捷性的需求。

Q4:稀释方案

稀释100倍:一步稀释。取5μl样本到495μl标准品&样本稀释液内,做100倍稀释; 稀释1000倍:两步稀释。取5μl样本到95μl标准品&样本稀释液内,做20倍稀释,再取5μl 20倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释1000倍; 稀释100000倍:三步稀释。取5μl样本到195μl标准品&样本稀释液内,做40倍稀释,再取5μl 40倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,最后取5μl 2000倍稀释样本到245μl标准品&样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释100000倍; 每步稀释时取液量不少于3μl,稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀,避免起泡。



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