Western Antibody Dilution Buffer (Block Quickly)
中文名称:Western一抗稀释液 (Block Quickly)
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- 应用性: WB
产品简介 | DIA·AN®生产的Western一抗稀释液(Block Quickly)是最新一代的高效抗体稀释液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉等的一抗稀释液,可以用于Western Blot (WB)时一抗的稀释和配制。
Western一抗稀释液(Block Quickly)可以有效节约抗体。本产品稀释和配制的抗体可以在4°C保存和使用不少于6个月,并且可以反复多次用于Western,利于节约一抗。 本稀释液不含血清和白蛋白,使用其稀释的抗体孵育后背景低,可确保极高的信噪比,同时能够缩短封闭时间至0.5~1h。 Western一抗稀释液(Block Quickly)使用便捷。本产品无需添加任何额外的试剂,可以直接用于一抗的稀释。 按照每次抗体稀释需要10 mL稀释液计算,一个100 mL包装的Western一抗稀释液(Block Quickly)可以稀释10次抗体,一个500 mL包装的Western一抗稀释液(Block Quickly)可以稀释50次抗体。 |
保存条件 | 2~8°C保存,有效期12个月。 |
注意事项 | 1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
Q1:WB一抗稀释液中含有叠氮钠吗?
本产品中不含叠氮钠,如有需要可自行添加。
Q2:可否用于非变性电泳?
不能,本产品含有DTT等还原剂,不可用于非变性电泳中。
Q3:若要使用此TBS配制TBST,吐温需要加入多少的量呢?
使用本产品配制TBST时,控制吐温终浓度为0.1%即可。
Q4:请问RIPA蛋白裂解液100ul差不多裂解多少细胞?
大约可裂解1X 10^6个细胞,如果使用孔板操作,建议6孔板中每孔加入100-150 μL RIPA裂解液。
Q5:这款缓冲液主要成分有哪些呢?
本款产品中主要成分为Tris-HCl、溴酚蓝、SDS、DTT、甘油等。
Q6:裂解液裂解不开,加入ripa后震荡,然后冰上裂解20分钟再离心,得到的是一团粘稠的液体?
RIPA裂解液裂解细胞后,细胞核内的DNA比较完整的弥散到样本里,形成一团黏糊糊的液体,遇到这种情况裂解后可再超声处理,在35~40%的功率下,超声处理样本1 min(冰浴条件下进行),超声2 s,间隔2 s,确保细胞充分裂解,降低样本粘度。
Q7:EDTA抗原修复液稀释后的pH需要再次进行调整吗?
本产品在使用时直接按说明书稀释至工作液浓度即可,无需额外调节pH值。
Q8:细胞裂解液裂解细胞后续做免疫共沉淀可以吗?
不可以, 免疫共沉淀的细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液,常规的RIPA裂解含有SDS,会对蛋白产生变性作用,对蛋白间的相互作用有影响。做免疫共沉淀推荐使用不含变性剂的裂解液。
Q9:若蛋白含有高分子杂带,可能存在二聚体,是否需要加入倍量缓冲液以打开二聚体?
如果蛋白样品中含有比较多的二聚体,可以添加还原剂DTT以帮助打开二聚体。
Q10:使用该4%多聚甲醛常温固定细胞15min后,细胞膜发生起泡现象,需要更换固定温度为4℃吗?
细胞膜发生起泡现象可能是由于固定时间过长所致,可以适当缩短固定时间,优化固定结果。