怎么选择合适的TUNEL 凋亡检测试剂盒
Source: Elabscience®Published: 2021-06-08
市面上常见的TUNEL产品主要有2大类,一类是荧光TUNEL产品(适用于荧光显微镜检测),一类是DAB显色TUNEL产品(适用于普通光学显微镜检测)。在选择TUNEL产品时,首先要考虑自己的实验室的显微镜属于哪种。
对于有荧光显微镜的实验室,我们推荐使用荧光TUNEL产品,荧光TUNEL产品跟DAB显色TUNEL产品相比有以下优势:
(1)实验时间短
(2)操作简便
(3)结果易观察
荧光TUNEL的实验结果为荧光图片,结果更直观,易于SCI文章发表。
Elabscience®可提供5种荧光TUNEL试剂盒,那么,如何选择合适的TUNEL荧光试剂盒呢?
第一步,确认荧光显微镜配置。
荧光显微镜由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成,它利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大,从而对样品结构或其组分进行定性、定位、定量观察检测。
DAPI用紫外光激发后发射蓝光,Elab Fluor®488和FITC用蓝光激发后发射绿光,Elab Fluor®594和Elab Fluor®555用绿光激发后发射红光,各荧光素具体光谱信息见下表。
荧光素 |
激发波长 |
发射波长 |
FITC |
490 |
520 |
Elab Fluor®488 |
495 |
519 |
Elab Fluor®555 |
555 |
565 |
Elab Fluor®594 |
590 |
617 |
Elab Fluor®647 |
650 |
665 |
DAPI |
372 |
456 |
第二步,确认实验样本是否带有荧光。
根据实验样本自带荧光情况,选择TUNEL试剂盒遵循以下原则:
(1)实验样本不含荧光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Green, FITC)或者One-step TUNEL Assay Kit (Green, Elab Fluor®488)
(2)如果实验样品带红光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Green, FITC)或者One-step TUNEL Assay Kit (Green, Elab Fluor®488)。
一般来说,Elab Fluor®488的抗淬灭效果优于FITC,如果需要长时间观察样本的绿色荧光推荐使用One-step TUNEL Assay Kit (Green, Elab Fluor®488)。
(3)如果实验样本带绿光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®594)或者One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®555)。
Elab Fluor®594与GFP的干扰更小,如果样本所带绿色荧光较强,优先推荐选择One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®594)。
(4)如果实验样品中同时有红色荧光和绿色荧光,推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®647),但是Elab Fluor®647对荧光显微镜要求比较高,需要显微镜配置有Cy5或Elab Fluor®647滤光片,一般共聚焦显微镜配置有该滤光片。