流式配色原则第三课：互斥抗原

前期，我们学习了流式配色原则：强弱搭配、荧光干扰（点击蓝字回顾），今天继续学习第三大原则——互相排斥的抗原允许溢漏，指的是配色时要注意抗原之间的相互关系，如果是互斥关系，则可以使用高干扰组合。

由于流式细胞仪通道数量有限，再加上多色流式实验时同时检测指标较多，我们不可避免地会使用高干扰荧光组合。如何使高干扰荧光组合对抗原检测的影响降到最低呢？这时我们可以考虑抗原间的相互关系，如果有互斥抗原，则可优先考虑高干扰荧光组合。

互斥是指两种抗原不会同时表达在一种细胞上，比如CD3⁺T细胞中，有一群细胞表达CD4，不表达CD8，另外一群细胞表达CD8，不表达CD4，CD4和CD8就属于互斥关系。即表达A不表达B，表达B不表达A。配色时，互斥的抗原是允许荧光溢漏的。

图1. CD4和CD8为互相排斥抗原

还有哪些抗原是互相排斥的呢？比如CD3和CD19，CD3是T细胞的Marker，CD19是B细胞的Marker，这两个抗原共同检测时，就可以使用高干扰组合。

图2. CD3和CD19为互相排斥抗原

C57BL/6小鼠NK细胞的标志物为CD3^-NK1.1⁺，即表达NK1.1，不表达CD3，那CD3和NK1.1这两个指标就可以使用高干扰组合， 如图所示：

图3. CD3和NK1.1为互相排斥抗原

说完互斥抗原，哪些情形下可能存在高干扰呢？荧光光谱重叠多、串联染料、多激光激发情况下，易出现荧光高干扰。如果想了解更多详细信息，可以查看我们上期流式课堂“流式配色原则第二课：荧光干扰”（点击回顾）中对荧光溢漏的三种情况的介绍。