一作分享 | 实战经验！盲肠结扎穿孔术构建小鼠脓毒症模型
Source: Elabscience®Published: 2024-03-20
脓毒症（Sepsis）是宿主对感染的反应失调而引起的危及生命的器官功能障碍。脓毒症可以由任何部位的感染引起，是严重创伤、烧伤、休克、感染和外科大手术等常见的并发症，病死率较高。
目前针对脓毒症的治疗仍然没有相应的特效药物。疾病模型的建立有助于人们更好地探讨脓毒症的发病机制和寻找有效的治疗措施，获得更早的诊断并采取干预措施，从而改善脓毒症患者的预后。
来自南方医科大学的宋老师，为我们分享了建模心得。盲肠结扎穿孔（Cecal ligation and puncture, CLP）模型是最接近于人类脓毒症机制的模型，被称为脓毒症模型的“金标准”。该模型通过结扎并穿孔盲肠，使混有多种细菌的肠内容物持续溢入腹腔，从而模拟细菌性腹膜炎的临床特点。当细菌转移进入血液时，会诱发全身性炎症反应，最终导致多器官衰竭和死亡。
BALB/c雄性小鼠(6-8周)
适应性喂养1周
禁食12 h
麻醉(腹腔注射1%戊巴比妥钠)
左下腹剃毛，消毒并用镊子拉出盲肠
手术缝线结扎75%的盲肠
挤出适量肠内容物，缝合
皮下注射预温37°C无菌生理盐水(1 mL)
选择6-8周BALB/c雄性小鼠，适应环境一周，禁食12 h后腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉。左下腹剃毛，碘伏消毒，开一小口（1 cm左右），用镊子轻轻将盲肠拉出，用不能吸收的3-0手术缝线结扎75%的盲肠，用21号针头穿孔，从穿刺处挤出适量肠内容物，再将盲肠放回腹腔，分别缝合腹膜和皮肤。小鼠皮下注射预温37℃无菌生理盐水（1 mL）进行液体复苏。
图1.CLP诱导的重度脓毒症示意图（结扎75%的盲肠）
(1)
小鼠盲肠一般在其左下腹；
(2)
结扎长度是模型死亡率的主要决定因素。结扎75%或以上的盲肠，为重度脓毒症（生存率为0%），结扎50%的盲肠，为中度脓毒症（生存率约为40%）。
以上是客户一作宋老师为我们分享的盲肠结扎穿孔术构建小鼠脓毒症模型的实验心得。欢迎更多老师来稿，分享您的实验干货！
