2-step plus Poly-HRP Anti Mouse/Rabbit IgG Detection System (with DAB solution)
中文名称:二步法免疫组化试剂盒 (Mouse/Rabbit) (带DAB显色液)
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- 应用性: IHC
产品简介 | 本公司最新推出的二步法免疫组化试剂盒,将二抗的单价 Fab 片段和过氧化物酶HRP聚合在一起,替代传统方法中的二抗和三抗,直接放大抗原抗体结合的信号,既保留了抗体特异性结合抗原的能力,又可有效地避免聚合分子过大而 造成的空间位阻。与传统的 SP 三步法相比,此试剂盒具有简单、快速、敏感等特点,试剂盒不再使用生物素,避免了由于内源性生物素所造成的背景染色。本产品可用于检测一抗是Rabbit和Mouse来源的单克隆抗体或多克隆抗体。
附带的DAB显色液自带稀释液,避免由于各地方水酸碱度的不同对 DAB 显色所造成的影响。 |
保存条件 | 2~8°C避光保存,不得冻存,有效期12个月。开封使用后,请在6个月内用完。 |
注意事项 | 1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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E-IR-R213 | 2-step plus Poly-HRP Anti Rabbit/Mouse IgG Detection System(with DAB Solution) | 50 mL , 18mL , 6mL , 3mL |
E-IR-R220 | Super PlusTM Highly Sensitive and Rapid Immunohistochemical Kit (pH9.0) | 10mL , 3mL |
E-IR-R221 | Super PlusTM Highly Sensitive and Rapid Immunohistochemical Kit (pH6.0) | 10mL , 3mL |
Q1:BSA做WB实验推荐什么浓度呢?
用TBST稀释,BSA浓度 2-5%。
Q2:跑胶结束后如何快速去除可能遮挡条带的溴酚蓝?
延长电泳时间可以使溴酚蓝与条带分开,对于小分子量蛋白建议更换浓度更适合的分离胶缓冲体系。
Q3:BCA浓度测得蛋白浓度3mg/ml,但加入缓冲液后发现无蛋白条带出现,是什么原因?
建议进行对比实验,设置BSA为阳性对照,与蛋白样本裂解液同时加入缓冲液混匀煮沸变性,上样进行电泳观察条带情况。
Q4:货号E-IR-R304A和E-IR-R304B的WB实验试剂盒里面是否包含E-IR-R305凝胶试剂?
E-IR-R305凝胶试剂盒是不包含在E-IR-R304A和E-IR-R304B里面的,需要单独购买凝胶试剂盒;
Q5:RIPA lysis buffer未开封在室温下存放了24小时能否继续使用?反复冻融的次数有限制吗?
本产品在室温下(25℃左右)放置24小时对产品效果无明显影响,可继续使用。但建议收货后立即分装并于-20℃保存,反复冻融次数不超过5次。
Q6:裂解液想问一下PMSF 跟Na3VO4的作用是?还有这个产品是什么浓度,如何使用?
这两个都是酶的抑制剂,作用是预防蛋白的降解。 PMSF常作为蛋白酶抑制剂被应用在生化和分子生物学实验中,是丝氨酸蛋白酶的抑制剂,可抑制胰蛋白酶(trypsin),糜蛋白酶(chymotrypsin)和AChE的活性。 Na3VO4是磷酸酶抑制剂,抑制ATP酶、碱性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶。 试剂盒这两个产品是100X的,使用前按照1:100的比例加入到PIPA裂解液中。
Q7:肿瘤组织切块在4%多聚甲醛固定液中,常温固定可以长期保存吗?
通常情况下,在4% 多聚甲醛中固定后,肿瘤组织切块可以在室温下保存数周至数月时间。对于长期保存,更好的做法是将固定后的组织样本转移到含有PBS等缓冲液的液体中,并且存放在4摄氏度的冰箱中,确保其稳定性和适用性。
Q8:提取悬浮细胞蛋白质时,能否直接加入该产品煮沸变性?
可以使用1×缓冲液直接进行煮沸,但需要注意此操作后得到的蛋白上样缓冲液不可用于BCA测浓度。
Q9:加入缓冲液的蛋白煮样时无沉淀,但第二天取出加样时有沉淀出现是因为什么呢?该如何解决?
变性后的蛋白缓冲液出现沉淀可能与蛋白样品中的离子浓度有关系,在温度变化过程中出现沉淀,可通过37℃以下的水浴孵育溶解。若仍有少量沉淀无法溶解可离心后取上清使用。
Q10:蛋白酶K使用时应该用什么溶液溶解?常用工作浓度是多少?需要在多少度下保存呢?
蛋白酶K有效pH范围为pH4.0~12.5,最佳pH范围为pH7.5-8.0。请根据实验需求尽量用上述适当pH的缓冲溶液,如:10mM Tris-HCl pH7.4-7.8,进行蛋白酶K溶液的配制。 蛋白酶K常用工作浓度为10~100ug/ml,储存液浓度一般为100~200mg/ml,-20℃保存,稀释至工作浓度后应尽快使用,避免长时间保存。