2-step plus Poly-HRP Anti Rabbit/Mouse IgG Detection System
中文名称：二步法免疫组化试剂盒(兔/小鼠)
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- 应用性： IHC
| 产品简介 | Elabscience 公司最新推出的二步法免疫组化试剂盒，将二抗的单价 Fab 片段和过氧化物酶HRP聚合在一起，替代传统方法中的二抗和三抗，直接放大抗原抗体结合的信号，既保留了抗体特异性结合抗原的能力，又可有效地避免聚合分子过大而 造成的空间位阻。与传统的 SP 三步法相比，此试剂盒具有简单、快速、敏感等特点，试剂盒不再使用生物素，避免了由于内源性生物素所造成的背景染色。本产品可用于检测一抗是Rabbit和Mouse来源的单克隆抗体或多克隆抗体，本品独特的聚合物辅助剂有利于大分子的检测系统更好地结合所检测的一抗分子。此检测系统是目前已知的灵敏度最高的免疫组化检测系统。 |
| 保存条件 | 2~8°C避光保存，不得冻存，有效期12个月。开封使用后，请在6个月内用完。 |
| 注意事项 | 1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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| E-IR-R213 | 2-step plus Poly-HRP Anti Rabbit/Mouse IgG Detection System（with DAB Solution） | 50 mL , 18mL , 6mL , 3mL |
Q1:若蛋白含有高分子杂带，可能存在二聚体，是否需要加入倍量缓冲液以打开二聚体？
如果蛋白样品中含有比较多的二聚体，可以添加还原剂DTT以帮助打开二聚体。
Q2:可否用于非变性电泳？
不能，本产品含有DTT等还原剂，不可用于非变性电泳中。
Q3:EDTA抗原修复液稀释后的pH需要再次进行调整吗？
本产品在使用时直接按说明书稀释至工作液浓度即可，无需额外调节pH值。
Q4:请问RIPA蛋白裂解液100ul差不多裂解多少细胞？
大约可裂解1X 10^6个细胞，如果使用孔板操作，建议6孔板中每孔加入100-150 μL RIPA裂解液。
Q5:这款缓冲液主要成分有哪些呢？
本款产品中主要成分为Tris-HCl、溴酚蓝、SDS、DTT、甘油等。
Q6:裂解液裂解不开，加入ripa后震荡，然后冰上裂解20分钟再离心，得到的是一团粘稠的液体？
RIPA裂解液裂解细胞后，细胞核内的DNA比较完整的弥散到样本里，形成一团黏糊糊的液体，遇到这种情况裂解后可再超声处理，在35~40％的功率下，超声处理样本1 min（冰浴条件下进行），超声2 s，间隔2 s，确保细胞充分裂解，降低样本粘度。
Q7:若要使用此TBS配制TBST，吐温需要加入多少的量呢？
使用本产品配制TBST时，控制吐温终浓度为0.1%即可。
Q8:细胞裂解液裂解细胞后续做免疫共沉淀可以吗?
不可以, 免疫共沉淀的细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液，常规的RIPA裂解含有SDS，会对蛋白产生变性作用，对蛋白间的相互作用有影响。做免疫共沉淀推荐使用不含变性剂的裂解液。
Q9:裂解液不加矾酸钠可以用吗？
如果是做磷酸化抗体，是必须加矾酸钠抑制剂，如果是做的普通抗体可以只加PMSF（蛋白酶抑制剂）。
Q10:使用该4%多聚甲醛常温固定细胞15min后，细胞膜发生起泡现象，需要更换固定温度为4℃吗？
细胞膜发生起泡现象可能是由于固定时间过长所致，可以适当缩短固定时间，优化固定结果。
