Tissue Fixation Solution / 4% Paraformaldehyde (with DEPC)
中文名称：组织固定液/4%多聚甲醛 (含DEPC)
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- 应用性： IHC;IF;FCM
| 产品简介 | 4%多聚甲醛固定液(4% Paraformaldehyde Tissue Fixation Solution)是免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)研究中最常用的固定剂之一，也可以应用于流式分析(FCM)。本产品配制在PBS溶液中，可直接用于组织或细胞的固定，无需稀释。若需使用更低浓度多聚甲醛，可用PBS按比例稀释。
固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固，终止内源或外源性酶反应，防止组织自溶或异溶，以保持组织原有的结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或弥散。固定液种类很多，常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。其固定原理不同，各有优缺点。目前在科学研究中多聚甲醛应用最广，通过形成分子间的交联从而使细胞或组织的三维结构得以被固定。多聚甲醛是甲醛的聚合物，性质比甲醛稳定，且对抗原的破坏能力弱于甲醛，因此，科学研究中常用多聚甲醛作为固定剂。 组织学上，4%的多聚甲醛穿透力强，固定均匀，能使组织硬化，有利于切片。本固定剂造成的组织收缩少，损伤小，较为温和，能很好的保存固有物质，保持组织的抗原性和细微结构。此外，多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂类物质。 本产品固定效果好、应用广，适用于各种常见细胞或组织的固定，对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果，主要作用于蛋白质，无法固定尿酸和糖类等。 本产品经反复测试，可以很好的适用于IHC、IF、和FCM等相关检测时样品的固定。 按照每个样品固定时需要1毫升固定液计算，一个包装的本产品可以固定100个或500个样品。 |
| 保存条件 | -20°C保存，有效期12个月。 |
| 注意事项 | 1. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响后续染色。 2. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 3. 多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24 h。 4. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果容易受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。 5. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，易造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。 6. 本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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| E-IR-R113 | Tissue Fixation Solution / 4% Paraformaldehyde (without DEPC) | 1000mL , 500mL , 100mL |
Q1:多聚甲醛保存时需要注意什么？易挥发吗？
多聚甲醛易挥发，注意低温密封避光保存。
Q2:使用该4%多聚甲醛常温固定细胞15min后，细胞膜发生起泡现象，需要更换固定温度为4℃吗？
细胞膜发生起泡现象可能是由于固定时间过长所致，可以适当缩短固定时间，优化固定结果。
Q3:多聚甲醛固定会破坏细胞膜吗？
多聚甲醛（PFA）是一种常用的组织固定剂，通常用于固定生物样本中的蛋白质和细胞结构。虽然PFA可以帮助保持细胞结构和蛋白质的形态，但由于PFA具有渗透性，可将细胞内外的蛋白质固定在一起，且不同细胞的渗透性也并不一致，故而PFA固定可能会造成对细胞膜的破坏。应根据将用于细胞膜的哪方面研究来选择合适的固定液。
Q4:肿瘤组织切块在4%多聚甲醛固定液中，常温固定可以长期保存吗？
通常情况下，在4% 多聚甲醛中固定后，肿瘤组织切块可以在室温下保存数周至数月时间。对于长期保存，更好的做法是将固定后的组织样本转移到含有PBS等缓冲液的液体中，并且存放在4摄氏度的冰箱中，确保其稳定性和适用性。
Q5:货号E-IR-R304A和E-IR-R304B的WB实验试剂盒里面是否包含E-IR-R305凝胶试剂？
E-IR-R305凝胶试剂盒是不包含在E-IR-R304A和E-IR-R304B里面的，需要单独购买凝胶试剂盒；
Q6:请问BSA室温下封闭多久？
封闭操作时间通常为1.5小时。
Q7:BSA做WB实验推荐什么浓度呢？
用TBST稀释，BSA浓度 2-5%。
Q8:裂解液想问一下PMSF 跟Na3VO4的作用是？还有这个产品是什么浓度，如何使用？
这两个都是酶的抑制剂，作用是预防蛋白的降解。 PMSF常作为蛋白酶抑制剂被应用在生化和分子生物学实验中，是丝氨酸蛋白酶的抑制剂，可抑制胰蛋白酶（trypsin），糜蛋白酶（chymotrypsin）和AChE的活性。 Na3VO4是磷酸酶抑制剂，抑制ATP酶、碱性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶。 试剂盒这两个产品是100X的，使用前按照1:100的比例加入到PIPA裂解液中。
Q9:该产品对于蛋白浓度是否有要求？若蛋白浓度较高是否需要提高缓冲液的浓度？
本产品对蛋白浓度无具体要求，按比例稀释使用即可。
Q10:RIPA lysis buffer未开封在室温下存放了24小时能否继续使用？反复冻融的次数有限制吗？
本产品在室温下（25℃左右）放置24小时对产品效果无明显影响，可继续使用。但建议收货后立即分装并于-20℃保存，反复冻融次数不超过5次。
