Cell Cycle Assay Kit (Red Fluorescence)
中文名称:细胞周期检测试剂盒(红色荧光)
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- 应用: 细胞周期
检测原理 | 细胞周期(cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制并加倍,且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期又可以分为间期(interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期又常划分为休眠期(G0),DNA合成前期(G1),DNA合成期(S),DNA合成后期(G2)。DNA周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况,即细胞增殖状况。利用细胞内DNA能够和荧光染料(如碘化丙啶—PI)结合的特性,细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样可检测细胞不同周期。
细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核裂解,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞前向光散射能力显著降低,侧向光散射能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察凋亡细胞。
PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1~2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。 |
检测方法 | 荧光法;流式 |
样本类型 | 细胞 |
检测时间 | 3 hours |
检测仪器 | 流式细胞仪 |
荧光 | PI |
Ex/Em | 536/617 |
Channel set | PI,PerCP,PE |
自备试剂 | 无水乙醇,PBS(E-BC-R187) |
保存温度 | 该产品可在2~8°C/-20°C避光条件下保存12个月,具体试剂组分的保存条件请参考说明书。 |
有效期 | 12个月 |
运输条件 | 冰袋 |
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E-CK-A301 | Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (with JC-1) | 100Assays , 50Assays , 20Assays |
E-CK-A320 | One-step TUNEL In Situ Apoptosis Kit (Green, FITC) | 100Assays , 50Assays , 20Assays |
E-CK-A362 | Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8) | 500Tests , 100Tests , 500Tests×20 |
Q1:流式抗体实验结果的数据不满意/ Annexin V数据不会分析,能帮我分析下吗?
对于使用我司产品的客户,我们提供免费数据分析服务。您可以添加我们流式技术支持的企业微信,并将FCS格式原始数据、细胞样本(具体什么样本、如何处理)、实验分组(空白管、单染管、全染管、每个样本染色了哪些抗体)、流式操作步骤(细胞悬液体积、细胞个数,抗体用量、染色时间和温度)等信息发送我们技术支持同事。
Q2:含有抗荧光淬灭的封闭剂(含DAPI)可以用来封片吗?
可以用来封片,如果用的话就不用我们试剂盒里面自带的DAPI染料,但是由于DAPI孵育后没有清洗,所以会造成较高的背景。
Q3:细菌样本能否用Tunel、Annexin V检测?
老师您好,我们的验证都是在哺乳动物细胞上进行的,细菌的细胞膜结构和哺乳动物细胞膜结构存在差异,这些产品不一定能够适用,建议老师查询文献或者进行预实验来确认。